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编号:12642195
快速PCR方法在金银花真伪鉴别中的应用(1)
http://www.100md.com 2014年10月1日 中国中药杂志 2014年第19期
     [摘要]建立简单快速的金银花真伪分子鉴别方法。该研究依据金银花trnL-trnF 625位G/T SNP位点设计快速位点特异性PCR引物,优化位点特异性PCR条件,对金银花及其9种混淆品进行扩增及检测。当在87 ℃预变性1 min;87 ℃变性5 s,68 ℃延伸5 s,30个循环时,通过加入SYBR Green I染料染色,金银花样品显绿色荧光,混淆品无荧光。整个PCR反应可在30 min内完成。该研究结果说明快速位点特异性PCR能简单快速鉴别金银花及其混淆品。

    [关键词]快速PCR;金银花;分子鉴定;荧光检测

    自Millus等1985年发明PCR技术以来,PCR已成为分子生物学研究中的最基本和普遍手段之一。由于PCR的重要性,为了提高实验效率、节约成本,对该技术的改良从未停止过。早在1991年,Yap等[1]通过更改PCR条件以缩短PCR反应时间。而Wittwer等[2-3]通过使用毛细管进行PCR反应 ......
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