2.2 标本收集 实验期间观察大鼠毛色、体重及精神状态，监测血糖。14周末用代谢笼收集24 h尿，测尿蛋白。2%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，留取血标本送检血肌酐、尿素氮、血糖，由全自动生化分析仪检测；取左侧肾脏标本，称肾重，计算肾脏指数(肾重/100 g 体重)。右肾组织，部分-80 ℃的低温冰箱冻存，用于RT-PCR及Western blot检测，部分用10%甲醛固定作病理学检查。

    2.3 肾脏病理组织学检查 右侧肾脏组织行PAS染色，PAS染色切片高倍镜(×400)每个标本随机选择5个肾小球，应用显微摄影系统摄取图像，采用Image J 图像分析软件测量肾小球面积，5个肾小球面积平均值为此标本平均肾小球面积(mean glomerular area，MGA)，并根据公式^[6]，平均肾小球体积(mean glomerular volume，MGV)=1.25×[MGA]3/2，计算平均肾小球体积。肾组织Wnt-1，β-catenin免疫组化染色采用SP法，按照试剂盒操作说明进行操作，阳性物质呈棕黄色颗粒状 ......