3 细胞毒活性实验(MTT法)

    收集生长良好的肿瘤细胞，用含10%小牛血清的RPMI1640培养基配制成1×10⁴ cell·mL^-1细胞悬液，于96孔培养板内接种，每孔100 μL(含1 000个肿瘤细胞)，置37 ℃，5%CO₂温箱内培养24 h后加药，实验设空白对照，受试样品设3个浓度(0.1，1，10 mg·L^-1)，每浓度3个平行孔，置37 ℃，5% CO₂温箱内培养4 d。弃去培养液，每孔加入MTT溶液(0.4 g·L^-1，RPMI1640配制)100 μL，37 ℃孵育4 h。弃上清液，每孔加入DMSO 150 μL，溶解Fomazan颗粒，轻度振荡后，用550型酶标仪在检测波长540 nm，参考波长405 nm下测定A值。结果计算：以药物的不同浓度及对细胞的抑制率作图可得到剂量反应曲线 ......