基于温补脾阳功效的附子水提物对腹泻模型大鼠效—毒关联评价(1)
[摘要]灌胃番泻叶液建立大鼠腹泻模型，预防实验给药与造模同时进行，共6 d；治疗实验造模12 d，第7天开始给药，给药时间为6 d。实验期间进行症状积分和体重称量，实验结束后摘取心、肝、脾、肾、脑、肾上腺、胸腺称重，并检测血清中乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase，LDH)和心肌肌钙蛋白-I(cardiac troponin-I，cTn-I)指标。分别研究附子水提物预防和治疗给药对腹泻大鼠的药效及其伴随毒性作用。结果显示附子水提物能改善腹泻大鼠的症状，预防给药药效的半数有效量(ED50)为1.420 4 g·kg-1，治疗给药的药效ED50为1.048 9 g·kg-1。附子水提物同时能降低心体比和升高血清LDH和cTn-I的水平。得出结论附子水提物对番泻叶致腹泻大鼠具有一定的预防和治疗作用，同时伴有一定的心脏毒性。
[关键词]附子；腹泻；功效；毒性
, http://www.100md.com 附子为毛茛科植物乌头Aconitum carmichaelli Debx.的子根的加工品[1]，性辛、甘，大热；有毒。归心、肾、脾经，为中药中“回阳救逆第一品”，具有回阳救逆，补火助阳，散寒止痛的功效。附子对虚寒吐泻症状有很好的疗效，同时根据临床报道和文献检索发现，附子临床应用的药品不良反应(ADR)主要是心脏的不良反应，其所含乌头碱的毒理作用主要是引起中枢神经和周围神经的兴奋，而后产生抑制。毒物并能直接作用于心肌，引起心脏功能改变，致心律失常[2]。鉴于此，本实验用番泻叶制备了大鼠腹泻模型，并对附子水提物对腹泻大鼠的疗效以及伴随心脏毒性(心体比值和心脏毒性指标LDH，cTn-I的变化)进行了观察和评价，将附子的功效与心脏毒性放在其主治病的基础上进行综合评价，平衡利弊，以期为附子在临床实践中可以更加安全、更加合理、更具疗效的应用提供实验依据。
1 材料
1.1 动物 Wistar 大鼠，雄性，体重140～200 g，共100只，购自山东省鲁抗医药股份有限公司，动物合格证号SCXK(鲁)20130001。
, 百拇医药
1.2 药物 附子购自北京同仁堂饮片有限责任公司，批号201232732-S。经山东省中医药研究院林慧彬研究员鉴定为毛茛科植物乌头A. carmichaeli的子根，按2010年版《中国药典》附子项下检查，符合各项规定。肠胃宁胶囊(山东仙河药业有限公司，批号130104)。番泻叶购自山东省中医院，经山东省中医药研究院林慧彬研究员鉴定为豆科植物狭叶番泻Cassia angustifolia Vahl或尖叶番泻C. acutifolia Delile的干燥小叶，且符合各项标准，可用于实验研究。
1.3 仪器与试剂 YP20001电子天平(上海上天精密仪器有限公司)；AL104电子天平[梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司]；KDM型调温电热套(山东鄄城华鲁电热仪器有限公司)；DZKM-S-6电热恒温水浴锅(北京市永光明医疗仪器厂)；UV-2102 PC型紫外-可见分光光度仪(中美合资尤尼柯有限公司)。LDH(乳酸脱氢酶)(20130722)、cTn-I(心肌肌钙蛋白)(201307)试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。
, 百拇医药
2 方法
2.1 受试药物的制备 取附子药材1 000.0 g用10.0倍量水浸泡，加热回流提取2次，每次1.5 h，16层纱布过滤，取药液浓缩至含生药量1.0 g·mL-1，批号20130419。实验前稀释至所需浓度，备用。
2.2 模型制备 番泻叶液制备：200 g番泻叶浸入100 ℃ 1 000 mL纯净水，充分搅拌30 min后用纱布绞出滤液600 mL备用；预防实验连续6 d每日上午灌胃20 mL·kg-1番泻叶液制作并维持模型腹泻状态，治疗实验连续12 d每天上午灌胃20 mL·kg-1番泻叶液制作并维持模型腹泻状态。
2.3 分组与给药 取大鼠200只，雌性各半，按体重分为空白组、腹泻模型组、附子水提液10.8，5.4，2.7，1.91，1.35，0.96，0.68 g·kg-1剂量组和中药阳性药组。
, 百拇医药
预防实验：试验用药组于模型制备同期分别给予不同剂量附子水提液。空白附子各剂量组每天造模后按20 mL·kg-1分别灌胃0.54，0.27，0.135，0.095，0.067 5，0.048，0.034 g·mL-1生药量的附子水提液；空白组每天按20 mL·kg-1灌胃蒸馏水；中药阳性药组每天造模后按20 mL·kg-1灌胃0.040 5 g·mL-1的肠胃宁胶囊水混悬液，试验周期6 d。
治疗实验：空白组外各组均造模并维持腹泻状态12 d；第7天开始附子各剂量组每天造模后按20 mL·kg-1分别灌胃0.54，0.27，0.135，0.095，0.067 5，0.048，0.034 g·mL-1生药量的附子水提液；空白组每天按20 mL·kg-1灌胃蒸馏水；中药阳性药组每天造模后按20 mL·kg-1灌胃0.040 5 g·mL-1的肠胃宁胶囊水混悬液。
2.4 观察与记录 每天称量体重并进行症状积分，积分标准如下(最少0分，最多3分)：0分：正常，粪便正常，呈圆柱形；1分：轻微腹泻，粪便稀软，有形；2分：中度腹泻，粪便黏稠，不成形，水分含量高；3分：严重腹泻，粪便呈液态，不成形，水样。, 百拇医药(栾永福 孙蓉)
[关键词]附子；腹泻；功效；毒性
, http://www.100md.com 附子为毛茛科植物乌头Aconitum carmichaelli Debx.的子根的加工品[1]，性辛、甘，大热；有毒。归心、肾、脾经，为中药中“回阳救逆第一品”，具有回阳救逆，补火助阳，散寒止痛的功效。附子对虚寒吐泻症状有很好的疗效，同时根据临床报道和文献检索发现，附子临床应用的药品不良反应(ADR)主要是心脏的不良反应，其所含乌头碱的毒理作用主要是引起中枢神经和周围神经的兴奋，而后产生抑制。毒物并能直接作用于心肌，引起心脏功能改变，致心律失常[2]。鉴于此，本实验用番泻叶制备了大鼠腹泻模型，并对附子水提物对腹泻大鼠的疗效以及伴随心脏毒性(心体比值和心脏毒性指标LDH，cTn-I的变化)进行了观察和评价，将附子的功效与心脏毒性放在其主治病的基础上进行综合评价，平衡利弊，以期为附子在临床实践中可以更加安全、更加合理、更具疗效的应用提供实验依据。
1 材料
1.1 动物 Wistar 大鼠，雄性，体重140～200 g，共100只，购自山东省鲁抗医药股份有限公司，动物合格证号SCXK(鲁)20130001。
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1.2 药物 附子购自北京同仁堂饮片有限责任公司，批号201232732-S。经山东省中医药研究院林慧彬研究员鉴定为毛茛科植物乌头A. carmichaeli的子根，按2010年版《中国药典》附子项下检查，符合各项规定。肠胃宁胶囊(山东仙河药业有限公司，批号130104)。番泻叶购自山东省中医院，经山东省中医药研究院林慧彬研究员鉴定为豆科植物狭叶番泻Cassia angustifolia Vahl或尖叶番泻C. acutifolia Delile的干燥小叶，且符合各项标准，可用于实验研究。
1.3 仪器与试剂 YP20001电子天平(上海上天精密仪器有限公司)；AL104电子天平[梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司]；KDM型调温电热套(山东鄄城华鲁电热仪器有限公司)；DZKM-S-6电热恒温水浴锅(北京市永光明医疗仪器厂)；UV-2102 PC型紫外-可见分光光度仪(中美合资尤尼柯有限公司)。LDH(乳酸脱氢酶)(20130722)、cTn-I(心肌肌钙蛋白)(201307)试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。
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2 方法
2.1 受试药物的制备 取附子药材1 000.0 g用10.0倍量水浸泡，加热回流提取2次，每次1.5 h，16层纱布过滤，取药液浓缩至含生药量1.0 g·mL-1，批号20130419。实验前稀释至所需浓度，备用。
2.2 模型制备 番泻叶液制备：200 g番泻叶浸入100 ℃ 1 000 mL纯净水，充分搅拌30 min后用纱布绞出滤液600 mL备用；预防实验连续6 d每日上午灌胃20 mL·kg-1番泻叶液制作并维持模型腹泻状态，治疗实验连续12 d每天上午灌胃20 mL·kg-1番泻叶液制作并维持模型腹泻状态。
2.3 分组与给药 取大鼠200只，雌性各半，按体重分为空白组、腹泻模型组、附子水提液10.8，5.4，2.7，1.91，1.35，0.96，0.68 g·kg-1剂量组和中药阳性药组。
, 百拇医药
预防实验：试验用药组于模型制备同期分别给予不同剂量附子水提液。空白附子各剂量组每天造模后按20 mL·kg-1分别灌胃0.54，0.27，0.135，0.095，0.067 5，0.048，0.034 g·mL-1生药量的附子水提液；空白组每天按20 mL·kg-1灌胃蒸馏水；中药阳性药组每天造模后按20 mL·kg-1灌胃0.040 5 g·mL-1的肠胃宁胶囊水混悬液，试验周期6 d。
治疗实验：空白组外各组均造模并维持腹泻状态12 d；第7天开始附子各剂量组每天造模后按20 mL·kg-1分别灌胃0.54，0.27，0.135，0.095，0.067 5，0.048，0.034 g·mL-1生药量的附子水提液；空白组每天按20 mL·kg-1灌胃蒸馏水；中药阳性药组每天造模后按20 mL·kg-1灌胃0.040 5 g·mL-1的肠胃宁胶囊水混悬液。
2.4 观察与记录 每天称量体重并进行症状积分，积分标准如下(最少0分，最多3分)：0分：正常，粪便正常，呈圆柱形；1分：轻微腹泻，粪便稀软，有形；2分：中度腹泻，粪便黏稠，不成形，水分含量高；3分：严重腹泻，粪便呈液态，不成形，水样。, 百拇医药(栾永福 孙蓉)