疏肝健脾方药含药血清对LPS刺激下大鼠肝细胞炎症损伤及TLR4/p38MAPK信号通路影响的研究(2)
2 方法2.1 分组 大鼠按随机数字表法分为3组,每组10只,分为正常组、疏肝健脾方药组(用于含药血清)、肝细胞提取组。根据李仪奎等[14-15]提出的制备含药血清的给药方法,按给药剂量=在体实验的给药剂量×反应系统中被稀释的倍数,在体实验的给药剂量根据本课题组前期[16]的研究中采用的合方组剂量为11.9 g·kg-1,在下一步的细胞体外培养系统中将加入20%的血清,因此采取在体实验的5倍剂量,故给药剂量=11.9 g·kg-1×5=59.5 g·kg-1;正常组给予等体积生理盐水。
2.2 含药血清的制备 大鼠均饲养于暨南大学动物实验管理中心SPF级实验室,开始给药前先自适应常规喂养7 d。第8天起运用李仪奎等[14]提出的血清药理实验通法方案开始灌胃给药,每天2次,12 h 1次,连续3 d。末次给药后行腹主动脉采血,每只约8~10 mL血液,以3 000 r·min-1离心15 min分离出血清,对分离好的血清行热灭活处理 ......
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