1.4 细胞中LC3 I/II抗体、mTOR抗体、p-mTOR S2448蛋白表达 采用Western blot检测上述蛋白的表达水平。在细胞刺激后的规定时间内，将12孔板中的液体倒掉，用PBS洗2遍，每个孔加入细胞裂解液100 μL进行裂解；再加入BPB和DTT各1 μL，于100 ℃沸水中煮4 min使蛋白变性；根据目的蛋白的相对分子质量配制7.5%或15%分离胶和10%浓缩胶；将等量(20 μL)的各种蛋白分别加样，在电泳槽中加满电泳缓冲液进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gelelectrophoresis，PAGE-SDS)；电泳完毕后，取下凝胶，将凝胶上的蛋白电转移至PVDF膜上，根据目的蛋白的位置留取所需PVDF膜；用含3%BSA的聚氧乙烯脱水山梨醇单月桂酸酯(tris buffered saline tween ......