2.3.2 不同激素浓度对叶片原生质体分裂的影响 对适宜的原生质体培养基进行改良，在添加了不同浓度2，4-D+KT组合、6-BA+NAA组合的培养基上，以5×104 个/mL的培养密度进行培养，激素配比见表2。

    每隔7 d，对每个培养皿添加相应的新鲜液体培养基0.5 mL，前2次添加含有渗透剂的液体培养基，以后每次添加除去渗透剂的原生质体培养基。

    2.3.3 植株再生 将纯化后得到的原生质体，稀释至较低的不同密度(100～500个/mL)，按照原生质体培养同步筛选出的最佳培养基及激素组合，依次采用下面培养方法进行培养：半固体培养看护(条件培养基)；液固双层培养(愈伤组织看护培养)。待愈伤织增大为直径2～3 mm时，及时转移到新的固体培养基上进行愈伤的增殖和分化培养。

    2.4 数据处理

    实验结果以±s的形式表示，计数资料采用方差检验，计量资料采用t检验。

    3 结果与分析

    3.1 叶肉原生质体的游离

    3.1.1 预处理对原生质体产量和活力的影响 在滴水珠叶片酶解前，对叶片进行低温黑暗预处理，并以未处理组作为对照。酶解得到的原生质体产量和活力见表3 ......