4 抗肿瘤活性测定

    将人肝癌细胞HepG2和人白血病细胞K562培养于含10%胎牛血清、青霉素(100 U·mL^-1)、链霉素(100 U·mL^-1)双抗的RPMI-1640 培养基中，在37 ℃，体积分数为5% CO2，相对湿度90% 的培养箱中培养，定期观察细胞生长情况，每2～3 d 用0.25% 的胰酶消化，进行传代培养。取对数生长期的HepG2和K562细胞，将细胞混悬液调整为6×104个/mL，接种于96孔版中。实验组和阴性对照组每孔加入100 μL的细胞悬液，待细胞贴壁后，加入不同浓度的药液200 μL。每组设置5个平行对照孔。加药48 h后，在生物安全柜中避光加入1 g·L^-1 MTT，50 μL/孔。再将细胞培养板放入培养箱中继续培养4 h后，用微量加样器加入SDS(十二烷基硫酸醇)100 μL/孔，用微型振荡器进行振荡混匀10min后 ......