茉莉酸甲酯对高山红景天愈伤组织中红景天苷和多糖积累的影响(3)
SOD活性(U·g-1 FW·h-1)=(A0-As)×Vt×60A0×0.5×FW×Vs×t,式中:A0为光对照管吸光度;As为样品测定管吸光度;Vt为样品提取液总体积(mL);Vs为测定时取酶液量(mL);t为显色反应时间(min);FW为样品鲜重(g)。称取新鲜的愈伤组织1.0 g,加入2 mL 20 mmol·L-1 KH2SO4于冰浴下研磨,研磨成匀浆后,加入7.0 mL的KH2SO4混合,混合液在4 000 r·min-1离心15 min,取上清液定容至10 mL量瓶中即为POD粗酶液。先配制反应混合液,即在50 mL 100 μmol·L-1磷酸缓冲液(pH 6.0)中加入28 μL愈创木酚,加热搅拌,直至溶解,待溶液冷却后,加入19 μL的30% H2O2混合均匀,低温保存备用。取反应混合液3 mL,酶提取液1 mL,在470 nm处读取0~3 min的A470(每隔1 min读数一次) ......
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