博落回内生真菌的分离及产血根碱菌株的筛选(2)
2.3产血根碱植物内生真菌的筛选2.3.1薄层色谱(TLC)初步检测把2.2制备的样品和对照品分别用毛细管在GF254硅胶板上点样,放置于层析缸中,展开剂为石油醚-甲醇(15∶1)溶液,在365 nm下,通过测量其Rf的大小来初步判断实验菌株是否产生血根碱。
2.3.2高效液相(HPLC)检测分析根据2.3.1的薄层色谱时在对照品相同位置有斑点出现的样品用液相加以确认。色谱柱为Phenomenex Gemini C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)柱;流动相为乙腈-水25∶75,流速1 mL·min-1,柱温30 ℃,检测波长270 nm,上样量为20 μL。
2.4菌株的鉴定
采用形态学特征进行初步鉴定,将产血根碱的菌株分别接种到PDA培养基、CA培养基及SNA培养基上于25 ℃培养箱里恒温培养7 d,根据菌落的外部形态特征与内生真菌的孢子有无及其形态来进行初步分类鉴定[15-16]。
3结果和分析
3.1内生真菌的分离纯化
3种不同的消毒方法后的空白对照中 ......
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