锌硼钼配施对北柴胡产量及柴胡皂苷a,d含量的影响(2)
1.3.2北柴胡产量测定2013年7月,北柴胡采收期,将小区北柴胡全部挖起,计算小区有效株数并称重,测定北柴胡产量。1.3.3柴胡皂苷a,d测定方法参照《中国药典》(2010年版,一部)高效液相色谱法,在适宜的色谱条件下测定柴胡皂苷a,d含量[2,9-10]。
Agilent Zorbax C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:0.1%磷酸水(A)-乙腈(B),梯度洗脱( 0~15 min,5%~20% B;15~30 min,20%~25% B;30~60 min,25% ~45% B;60~70 min,45%~50% B);流速 1.0 mL·min-1;检测波长203 nm;柱温 35 ℃。
供试品溶液的制备:精密称定粉碎并过60目筛的柴胡药材2.0 g,置具塞锥形瓶中,精密加入含5%浓氨的甲醇溶液40 mL,密塞,称重,超声(功率250 W,频率40 kHz)处理30 min,放冷,再称重,用70%甲醇补足失重,过滤,用70%甲醇洗涤药渣,合并滤液及洗涤液置磨口圆底烧瓶中,于50 ℃水浴旋转蒸发至干。残渣用甲醇溶解并转移至10 mL量瓶中并定容至刻度,摇匀,0.45 μm微孔滤膜过滤 ......
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