2.4LDH的测定取各组细胞培养上清液20 μL，每组设置6个复孔，按试剂盒说明书操作，在440 nm酶标仪测定A。

    2.5SOD活性和MDA水平的测定去除上述各组细胞培养基，经PBS洗3次后，加入细胞裂解液吹打，使细胞裂解，收集各组细胞裂解液并作好标记，按试剂盒说明书方法测定SOD活性和MDA水平。

    2.6流式细胞术检测rBMECs细胞周期及早期凋亡的变化每组设置3个复孔，去除各组细胞培养基，经PBS洗3次，加入0.25%胰蛋白酶消化细胞，终止消化后，分成2份离心收集细胞，其中一份以70%乙醇-20 ℃固定2 h，PBS和stain buffer分别清洗细胞1次，碘化丙啶(PI)染色30 min，流式细胞术检测。另一份加Annexin V binding buffer 500 μL振荡成单细胞悬液，室温下暗室经FITC Annexin/PI双染15 min后，流式细胞术检测。

    2.7RT-PCR法检测ICAM-1，MMP-9，P53 mRNA表达应用Trizol提取细胞总RNA，取等量RNA 进行逆转录反应，并使用以下特异性引物进行PCR 扩增鉴定：ICAM-1(NM_012967.1)上游5′-TCTCATGCCCGTGAAATTATG-3′ ......