中药生物药剂学分类系统中多成分环境对葛根素溶解度的影响(1)
[摘要] 该研究针对中药生物药剂学分类系统(biopharmaceutics classification system of Chinese materia medica， CMMBCS)中的溶解度问题，实验考察人工制造的多成分环境对溶解度的影响，并利用所获数据进行数学建模总结相关规律。实验采用递进式设计，分别研究了单一成分背景(黄芩苷、小檗碱和甘草酸)、两成分背景(黄芩苷+甘草酸、黄芩苷+小檗碱和甘草酸+小檗碱)和三成分背景(黄芩苷+甘草酸+小檗碱)对葛根素溶解度影响的变化趋势，从而建立多成分环境对葛根素溶解度影响的数学回归模型方程。
[关键词] 中药生物药剂学分类系统;多成分环境;溶解度;葛根素;数学建模
[收稿日期] 2014-07-18
[基金项目] 国家自然科学基金项目(81473362);北京中医药大学创新团队发展计划项目(2011-CXTD-13)
, http://www.100md.com
[通信作者] *董玲，副研究员，硕士生导师，主要从事新剂型给药系统研究，Tel：(010)64286245，E-mail：dongling@bucm.edu.cn;*张强，助理实验师，主要从事中药制剂分析研究，Tel：(010)84738629，E-mail：zhangqiang967@163.com
[作者简介] 侯成波，硕士研究生，E-mail：luhou2006@163.com
中药生物药剂学分类系统中，对溶解性的评价，一定要注重成分所处的多成分环境，在多成分环境中呈现的溶解度才是CMMBCS的真正分类依据。无论何种药物，其成分只有在溶解状态才能被吸收，在肠液中溶解度较差的药物，肠道内的吸收就被限制[1]。单一成分溶解度的研究已经有了较成熟的研究方法与评价体系，而对于多成分的中药，其多成分环境下药物的溶解度值得深入研究。因此，本研究选取中药复方中的高含量成分(对环境影响大)设计人工多成分环境，通过递进式实验采集实验数据，进而用所获数据数学建模，总结多成分环境对葛根素溶解度影响的规律。
, http://www.100md.com
本研究基于经方葛根芩连汤(葛根、黄芩、黄连和甘草组成)，以葛根素为研究对象，选择复方中其余3味药的高含量成分黄芩苷、小檗碱和甘草酸人工设计葛根素溶解度研究的多成分环境，用于数据采集。借鉴化学药品的溶解度实验基本方法，采用递进式的实验流程，依次实验考察黄芩苷、甘草酸和小檗碱各单一成分、任意两成分组合和全部三成分背景下的葛根素的溶解度，并用实验所获数据建模。
1 材料与试剂
1.1 仪器
Waters液相色谱系统(600四元泵，美国Waters公司)，2487双波长紫外检测器，Empower 2工作站;电子分析天平(BT-25S，北京赛多利斯仪器有限公司);pH酸度计(FE20，梅特勒-托利多仪器上海有限公司)。
1.2 药物
葛根素对照品(批号110752-200912，中国食品药品检定研究院);葛根素原料(批号120504，陕西中鑫生物技术有限公司);黄芩苷原料(批号ZL-A-018，南京泽朗医药科技有限公司);盐酸小檗碱原料(批号120212，陕西中鑫生物技术有限公司);甘草酸单铵原料(批号GU20120611，武汉金诺化工有限公司)。
, http://www.100md.com
1.3 试剂
乙腈购买于美国Fisher公司(色谱级);磷酸购买于北京化工厂(分析级);娃哈哈纯净水购买于娃哈哈集团公司(中国杭州)。盐酸、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、氢氧化钠、一水枸橼酸、磷酸氢二钠(均购自北京化工厂)等试剂都为分析纯。
2 方法
2.1 不同pH缓冲液的配制
pH 1.0盐酸溶液配制：量取盐酸溶液9 mL，加水稀释至1 000 mL，即得。pH 4.0缓冲液配制：取一水枸橼酸12.90 g，取磷酸氢二钠27.25 g，加水1 000 mL溶解，即得。pH 6.8缓冲液配制：取磷酸二氢钾1.70 g和磷酸氢二钾1.78 g，加水溶解稀释至1 000 mL，即得。pH 7.4缓冲液配制：取磷酸二氢钾6.81 g，加0.1 mol·L-1氢氧化钠溶液395 mL稀释至1 000 mL，即得。
, 百拇医药
2.2 对照品溶液制备
精密称取葛根素对照品10 mg，置100 mL量瓶中加入不同的溶出介质适量，置超声仪中使完全溶解，加溶出介质至刻度，摇匀，制成质量浓度约为0.1 g·L-1的对照品溶液。
2.3 色谱方法
Phenomenex Luna C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm);流速1.0 mL·min-1;检测波长250 nm;柱温30 ℃;进样量20 μL;流动相0.05%磷酸溶液-乙腈(82∶18)。
2.4 葛根素溶解度研究[2]
2.4.1 葛根素在不同pH缓冲液中溶解度研究 精密称取葛根素200 mg，分别加入pH为1.0，4.0，6.8，7.4的缓冲液10 mL，混合均匀，置于37 ℃水浴，每5 min震摇30 s，30 min后取出，静置10 min，取上清液，稀释至适宜浓度后过0.45 μm滤膜，进行HPLC分析。
, 百拇医药
2.4.2 葛根素单成分及两成分背景中溶解度研究 精密称取葛根素200 mg，加入不同配比黄芩苷、小檗碱及甘草酸，同2.4.1项描述方法进行溶解度考察。单一成分背景配比：黄芩苷加入比例：30%，50%，80%，100%，120%，150%;小檗碱加入比例：低浓度区域2%，4%，6%，8%，10%;高浓度区域12%，15%，20%，30%，40%，50%，60%，100%;甘草酸加入比例：10%，30%，50%，80%，100%，120%，150%，200%。两成分背景配比：黄芩苷+甘草酸加入比例：25%+25%，60%+25%，25%+60%，25%+75%，75%+25%，75%+75%，60%+60%，100%+60%，60%+100%;黄芩苷+小檗碱加入比例：6%+100%，30%+100%，100%+100%，60%+60%，6%+10%，10%+6%，30%+2%，30%+10%，60%+6%，100%+10%;甘草酸+小檗碱加入比例：10%+100%，30%+60%，80%+100%，30%+6%，10%+10%，80%+2%，80%+10%，100%+60%，100%+6%，150%+100%，150%+10%。, 百拇医药(侯成波 汪国鹏 张强 杨文宁 吕贝然 隗丽 董玲)
[关键词] 中药生物药剂学分类系统;多成分环境;溶解度;葛根素;数学建模
[收稿日期] 2014-07-18
[基金项目] 国家自然科学基金项目(81473362);北京中医药大学创新团队发展计划项目(2011-CXTD-13)
, http://www.100md.com
[通信作者] *董玲，副研究员，硕士生导师，主要从事新剂型给药系统研究，Tel：(010)64286245，E-mail：dongling@bucm.edu.cn;*张强，助理实验师，主要从事中药制剂分析研究，Tel：(010)84738629，E-mail：zhangqiang967@163.com
[作者简介] 侯成波，硕士研究生，E-mail：luhou2006@163.com
中药生物药剂学分类系统中，对溶解性的评价，一定要注重成分所处的多成分环境，在多成分环境中呈现的溶解度才是CMMBCS的真正分类依据。无论何种药物，其成分只有在溶解状态才能被吸收，在肠液中溶解度较差的药物，肠道内的吸收就被限制[1]。单一成分溶解度的研究已经有了较成熟的研究方法与评价体系，而对于多成分的中药，其多成分环境下药物的溶解度值得深入研究。因此，本研究选取中药复方中的高含量成分(对环境影响大)设计人工多成分环境，通过递进式实验采集实验数据，进而用所获数据数学建模，总结多成分环境对葛根素溶解度影响的规律。
, http://www.100md.com
本研究基于经方葛根芩连汤(葛根、黄芩、黄连和甘草组成)，以葛根素为研究对象，选择复方中其余3味药的高含量成分黄芩苷、小檗碱和甘草酸人工设计葛根素溶解度研究的多成分环境，用于数据采集。借鉴化学药品的溶解度实验基本方法，采用递进式的实验流程，依次实验考察黄芩苷、甘草酸和小檗碱各单一成分、任意两成分组合和全部三成分背景下的葛根素的溶解度，并用实验所获数据建模。
1 材料与试剂
1.1 仪器
Waters液相色谱系统(600四元泵，美国Waters公司)，2487双波长紫外检测器，Empower 2工作站;电子分析天平(BT-25S，北京赛多利斯仪器有限公司);pH酸度计(FE20，梅特勒-托利多仪器上海有限公司)。
1.2 药物
葛根素对照品(批号110752-200912，中国食品药品检定研究院);葛根素原料(批号120504，陕西中鑫生物技术有限公司);黄芩苷原料(批号ZL-A-018，南京泽朗医药科技有限公司);盐酸小檗碱原料(批号120212，陕西中鑫生物技术有限公司);甘草酸单铵原料(批号GU20120611，武汉金诺化工有限公司)。
, http://www.100md.com
1.3 试剂
乙腈购买于美国Fisher公司(色谱级);磷酸购买于北京化工厂(分析级);娃哈哈纯净水购买于娃哈哈集团公司(中国杭州)。盐酸、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、氢氧化钠、一水枸橼酸、磷酸氢二钠(均购自北京化工厂)等试剂都为分析纯。
2 方法
2.1 不同pH缓冲液的配制
pH 1.0盐酸溶液配制：量取盐酸溶液9 mL，加水稀释至1 000 mL，即得。pH 4.0缓冲液配制：取一水枸橼酸12.90 g，取磷酸氢二钠27.25 g，加水1 000 mL溶解，即得。pH 6.8缓冲液配制：取磷酸二氢钾1.70 g和磷酸氢二钾1.78 g，加水溶解稀释至1 000 mL，即得。pH 7.4缓冲液配制：取磷酸二氢钾6.81 g，加0.1 mol·L-1氢氧化钠溶液395 mL稀释至1 000 mL，即得。
, 百拇医药
2.2 对照品溶液制备
精密称取葛根素对照品10 mg，置100 mL量瓶中加入不同的溶出介质适量，置超声仪中使完全溶解，加溶出介质至刻度，摇匀，制成质量浓度约为0.1 g·L-1的对照品溶液。
2.3 色谱方法
Phenomenex Luna C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm);流速1.0 mL·min-1;检测波长250 nm;柱温30 ℃;进样量20 μL;流动相0.05%磷酸溶液-乙腈(82∶18)。
2.4 葛根素溶解度研究[2]
2.4.1 葛根素在不同pH缓冲液中溶解度研究 精密称取葛根素200 mg，分别加入pH为1.0，4.0，6.8，7.4的缓冲液10 mL，混合均匀，置于37 ℃水浴，每5 min震摇30 s，30 min后取出，静置10 min，取上清液，稀释至适宜浓度后过0.45 μm滤膜，进行HPLC分析。
, 百拇医药
2.4.2 葛根素单成分及两成分背景中溶解度研究 精密称取葛根素200 mg，加入不同配比黄芩苷、小檗碱及甘草酸，同2.4.1项描述方法进行溶解度考察。单一成分背景配比：黄芩苷加入比例：30%，50%，80%，100%，120%，150%;小檗碱加入比例：低浓度区域2%，4%，6%，8%，10%;高浓度区域12%，15%，20%，30%，40%，50%，60%，100%;甘草酸加入比例：10%，30%，50%，80%，100%，120%，150%，200%。两成分背景配比：黄芩苷+甘草酸加入比例：25%+25%，60%+25%，25%+60%，25%+75%，75%+25%，75%+75%，60%+60%，100%+60%，60%+100%;黄芩苷+小檗碱加入比例：6%+100%，30%+100%，100%+100%，60%+60%，6%+10%，10%+6%，30%+2%，30%+10%，60%+6%，100%+10%;甘草酸+小檗碱加入比例：10%+100%，30%+60%，80%+100%，30%+6%，10%+10%，80%+2%，80%+10%，100%+60%，100%+6%，150%+100%，150%+10%。, 百拇医药(侯成波 汪国鹏 张强 杨文宁 吕贝然 隗丽 董玲)