3.3.2 BP连接反应 获得目的片段后进行BP反应，产物转化DH5α，在Kan抗性的LB培养皿37 ℃培养过夜，挑取单克隆，做菌液PCR鉴定，见图4。提取测序正确样品的质粒进行的LR反应。

    图4 过表达(上)和RNAi(下)基因BP反应凝胶电泳

    Fig.4 BP reactions PCR gel electrophoresis of overexpression(upper) and RNAi(lower) gene

    3.3.3 LR连接反应 BP反应的产物经过LR反应，分别将目的基因克隆到过表达载体pH7WG2D和干扰载体pK7GWIWG2D上，转化DH5α，在Spe抗性的LB培养皿37 ℃培养过夜，挑取单克隆，做菌液PCR鉴定，见图5。测序结果显示与目的基因的序列一致，说明新疆紫草次生代谢关键基因PAL，HMGR，PGT的过表达和RNAi载体构建成功。

    图5 过表达(上)和RNAi(下)基因LR反应凝胶电泳

    Fig.5 LR reactions PCR gel electrophoresis of overexpression (upper) and RNAi (lower) gene

    本研究从NCBI获得新疆紫草PAL ......