阿魏酸的微针透皮给药研究(1)
[摘要] 探索微针阵列作用下阿魏酸的透皮给药规律及对大鼠毛细血管通透性的影响。采用改良Franz 扩散池法，以大鼠腹皮为体外模型，考察微针的长度、刺入力、滞留时间对阿魏酸透皮给药的影响规律。以高效液相色谱法测定阿魏酸的含量。大鼠尾静脉注射0.5%伊文思蓝生理盐水，腹部脱毛微针处理后给药，二甲苯致炎，鼠皮中伊文思蓝含量采用全自动酶标仪590 nm波长处比色，测吸光度。微针阵列预处理与被动扩散比较显著增加阿魏酸单位面积累积透过量，并提高其经皮渗透速率(P<0.01)，药物的累积渗透量随着微针处理皮肤的刺入力的增加而增加， 随着微针在皮肤中滞留时间的延长不断增大，不同长度微针对阿魏酸透皮均有促进作用，但不随着针长的增加而增加。微针作用后，阿魏酸对大鼠皮肤伊文思蓝含量的降低显著强于阿魏酸单独作用组。阿魏酸微针经皮给药，透皮速率显著提高，并且微针长度、所受力、在皮肤中滞留时间对阿魏酸的经皮渗透具有重要影响。
[关键词] 阿魏酸;微针阵列;透皮吸收;毛细血管通透性
, http://www.100md.com [收稿日期] 2014-08-21
[基金项目] 国家“重大新药创制”科技重大专项(2014ZX09301306009);北京中医药大学复方中药制药研究创新团队发展计划项目(2011-CXTD-13);北京中医药大学自主课题项目(2014-QNTSZX009)
[通信作者] 杜守颖，教授，博士生导师，主要从事中药新剂型与制剂关键技术研究，Tel：(010)84738615，E-mail：dushouying@263.net;白洁，讲师，主要从事中药经皮给药系统的研究，Tel：(010)84738615，E-mail：22623689@qq.com
[作者简介] 杨冰，硕士研究生，E-mail：yangbing1028@163.com
透皮给药系统是指使药物以一定的速率通过皮肤，经毛细血管吸收进入血液循环而达到有效血药浓度产生疗效的一类给药系统[1]，具有安全、方便、避免肝脏首过效应的特点。但由于皮肤角质层的阻碍，使药物难以透过皮肤发挥治疗作用。微针透皮给药系统具有皮下注射和透皮给药的双重优势，可以穿透角质层并留下微小孔道，具有显著的促渗效果，同时不产生痛感，近年来已广泛用于各类药物，尤其是大分子蛋白质[2]、肽类[3]、DNA[4]和疫苗[5]等，也见于中药成分的透皮给药[6]。
, 百拇医药
阿魏酸是桂皮酸的衍生物之一，存在于当归、川芎等多种中药中，具有多种药理活性[7]。阿魏酸口服易吸收但代谢快半衰期短。本实验考察了不同微针条件对阿魏酸透皮吸收的影响，评价微针促进阿魏酸透皮吸收的影响因素，为含有阿魏酸的中药开发新的外用制剂提供实验依据。
1 材料
TK-12B 透皮扩散试验仪(上海-科技贸易有限公司);Agilent 1260高效液相色谱仪，Agilent化学工作站(美国安捷伦公司);KQ5200DA 超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);BS 110S型电子分析天平(北京赛多利斯公司);Mettle 酸度计(德国);全自动酶标仪(Multiskan Go型，美国Thermo公司)。Micro Needle Derma Stamp(型号：DTR- 250 μm，500 μm，750 μm， 广州意凯电子科技有限公司)。
阿魏酸对照品(批号110773-201012)购自中国食品药品检定研究院;阿魏酸(纯度>98%，湖北康宝泰精细化工);甲醇(MREDA 公司，色谱纯);醋酸(Fisher Chemicals);娃哈哈纯净水(杭州娃哈哈集团);磷酸氢二钠、磷酸二氢钠(国药集团化学试剂有限公司，分析纯)。
, 百拇医药
雄性SD大鼠，体重160～180 g，6周龄，由维通利华实验动物中心提供，动物合格证号SCXK(京)2012-0001。
2 方法
2.1 阿魏酸的方法学考察
2.1.1 色谱条件 Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×150 mm，5 μm);流动相甲醇-1%醋酸(43∶57);柱温25 ℃;流速1.0 mL·min-1;检测波长323 nm;进样量10 μL。
2.1.2 标准曲线的制作 取阿魏酸对照品5 mg，精密称定，置50 mL棕色量瓶中，用等渗磷酸盐缓冲液(PBS，pH 7.4)溶解并稀释至刻度，摇匀，即得质量浓度为100 mg·L-1的对照品储备液。精密量取一定量的储备液加PBS稀释成质量浓度为0.1，0.5，1.0，2.0，5.0，10.0，20.0 mg·L-1的对照品溶液。在上述色谱条件下取10 μL进样，以质量浓度C为横坐标，峰面积A为纵坐标作线性回归，回归方程为A=53.730C-5.023(r=0.999 9)，线性范围0.106～21.2 mg·L-1。
, 百拇医药
2.1.3 精密度试验 取1.05 mg·L-1的阿魏酸对照品溶液10 μL，重复进样6次计算峰面积的RSD 0.73%，仪器精密度良好。
2.1.4 稳定性试验 取1.05 mg·L-1的阿魏酸对照品溶液，按上述色谱条件，分别在0，4，8，12，16，24 h进样，峰面积的RSD 0.93%，表明阿魏酸在24 h内稳定性良好。
2.1.5 回收率试验 取已知浓度的12 h空白对照组接收液0.5 mL，分别精密加入1.0 mg·L-1的阿魏酸对照品溶液1.0，0.8，0.6 mL，充分混匀后，吸取10 μL样品按上述色谱条件测定。阿魏酸平均回收率为98.20%，RSD 0.35%(n=6)。, http://www.100md.com(杨冰 杜守颖 白洁 尚可心 陆洋 李鹏跃)
[关键词] 阿魏酸;微针阵列;透皮吸收;毛细血管通透性
, http://www.100md.com [收稿日期] 2014-08-21
[基金项目] 国家“重大新药创制”科技重大专项(2014ZX09301306009);北京中医药大学复方中药制药研究创新团队发展计划项目(2011-CXTD-13);北京中医药大学自主课题项目(2014-QNTSZX009)
[通信作者] 杜守颖，教授，博士生导师，主要从事中药新剂型与制剂关键技术研究，Tel：(010)84738615，E-mail：dushouying@263.net;白洁，讲师，主要从事中药经皮给药系统的研究，Tel：(010)84738615，E-mail：22623689@qq.com
[作者简介] 杨冰，硕士研究生，E-mail：yangbing1028@163.com
透皮给药系统是指使药物以一定的速率通过皮肤，经毛细血管吸收进入血液循环而达到有效血药浓度产生疗效的一类给药系统[1]，具有安全、方便、避免肝脏首过效应的特点。但由于皮肤角质层的阻碍，使药物难以透过皮肤发挥治疗作用。微针透皮给药系统具有皮下注射和透皮给药的双重优势，可以穿透角质层并留下微小孔道，具有显著的促渗效果，同时不产生痛感，近年来已广泛用于各类药物，尤其是大分子蛋白质[2]、肽类[3]、DNA[4]和疫苗[5]等，也见于中药成分的透皮给药[6]。
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阿魏酸是桂皮酸的衍生物之一，存在于当归、川芎等多种中药中，具有多种药理活性[7]。阿魏酸口服易吸收但代谢快半衰期短。本实验考察了不同微针条件对阿魏酸透皮吸收的影响，评价微针促进阿魏酸透皮吸收的影响因素，为含有阿魏酸的中药开发新的外用制剂提供实验依据。
1 材料
TK-12B 透皮扩散试验仪(上海-科技贸易有限公司);Agilent 1260高效液相色谱仪，Agilent化学工作站(美国安捷伦公司);KQ5200DA 超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);BS 110S型电子分析天平(北京赛多利斯公司);Mettle 酸度计(德国);全自动酶标仪(Multiskan Go型，美国Thermo公司)。Micro Needle Derma Stamp(型号：DTR- 250 μm，500 μm，750 μm， 广州意凯电子科技有限公司)。
阿魏酸对照品(批号110773-201012)购自中国食品药品检定研究院;阿魏酸(纯度>98%，湖北康宝泰精细化工);甲醇(MREDA 公司，色谱纯);醋酸(Fisher Chemicals);娃哈哈纯净水(杭州娃哈哈集团);磷酸氢二钠、磷酸二氢钠(国药集团化学试剂有限公司，分析纯)。
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雄性SD大鼠，体重160～180 g，6周龄，由维通利华实验动物中心提供，动物合格证号SCXK(京)2012-0001。
2 方法
2.1 阿魏酸的方法学考察
2.1.1 色谱条件 Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×150 mm，5 μm);流动相甲醇-1%醋酸(43∶57);柱温25 ℃;流速1.0 mL·min-1;检测波长323 nm;进样量10 μL。
2.1.2 标准曲线的制作 取阿魏酸对照品5 mg，精密称定，置50 mL棕色量瓶中，用等渗磷酸盐缓冲液(PBS，pH 7.4)溶解并稀释至刻度，摇匀，即得质量浓度为100 mg·L-1的对照品储备液。精密量取一定量的储备液加PBS稀释成质量浓度为0.1，0.5，1.0，2.0，5.0，10.0，20.0 mg·L-1的对照品溶液。在上述色谱条件下取10 μL进样，以质量浓度C为横坐标，峰面积A为纵坐标作线性回归，回归方程为A=53.730C-5.023(r=0.999 9)，线性范围0.106～21.2 mg·L-1。
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2.1.3 精密度试验 取1.05 mg·L-1的阿魏酸对照品溶液10 μL，重复进样6次计算峰面积的RSD 0.73%，仪器精密度良好。
2.1.4 稳定性试验 取1.05 mg·L-1的阿魏酸对照品溶液，按上述色谱条件，分别在0，4，8，12，16，24 h进样，峰面积的RSD 0.93%，表明阿魏酸在24 h内稳定性良好。
2.1.5 回收率试验 取已知浓度的12 h空白对照组接收液0.5 mL，分别精密加入1.0 mg·L-1的阿魏酸对照品溶液1.0，0.8，0.6 mL，充分混匀后，吸取10 μL样品按上述色谱条件测定。阿魏酸平均回收率为98.20%，RSD 0.35%(n=6)。, http://www.100md.com(杨冰 杜守颖 白洁 尚可心 陆洋 李鹏跃)