金丝桃苷对大鼠离体大脑中动脉血管内皮功能的影响及其内在机制的研究(1)
[摘要] 研究金丝桃苷(hyperoside，Hyp)对大鼠离体大脑中动脉(middle cerebral artery，MCA)血管内皮功能的影响，探讨其可能存在的机制。采用动脉加压灌注法测定脑血管舒缩功能和细胞膜电位记录法测定血管平滑肌细胞膜静息电位，观察Hyp(1×10-6～1×10-4 mol·L-1)对U46619(1×10-7mol·L-1)预收缩大鼠MCA的作用。结果发现，累加浓度的Hyp可诱导U46619预收缩大鼠离体MCA产生明显浓度依赖性的舒张作用和血管平滑肌细胞膜静息电位超极化反应，其最大舒张率为(73.2±6.1)%，最大超极化幅度为(-13.2±2.2) mV。去除血管内皮细胞后，Hyp仍有一定的舒张反应和超极化作用，但其作用明显减弱，与血管内皮完整组比较，差异显著(P<0.01);在合用一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NAME(3×10-5 mol·L-1)和前列环素(PGI2)合成酶抑制剂Indo(1×10-5 mol·L-1)后，Hyp仍可介导大鼠MCA产生显著的舒张反应和超极化作用;1×10-3mol·L-1 Ca2+激活性钾通道(KCa)阻断剂TEA或1×10-4 mol·L-1胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)抑制剂PPG可明显减弱Hyp诱导大鼠MCA产生的非NO非PGI2样舒张作用和超极化反应;外源性硫化氢(H2S)的供体NaHS(1×10-5～1×10-3mol·L-1)或H2S合酶(CSE)底物L-Cys(1×10-5～1×10-3mol·L-1)可介导大鼠MCA产生一定的舒张作用和超极化反应。结果表明，Hyp可诱导大鼠MCA产生内皮依赖性和较弱的内皮非依赖性血管舒张作用和超极化作用，其内皮依赖性舒张作用可能与Hyp促使MCA内皮细胞生成内源性H2S增多，继而激活KCa，使KCa通道开放，引起细胞膜超极化，进而阻滞Ca2+内流，从而产生舒张血管作用有关。
, 百拇医药
[关键词] 金丝桃苷;血管舒张;超极化;内皮源性超极化因子;硫化氢
[收稿日期] 2014-06-18
[基金项目] 国家自然科学基金项目(30840104，81173596)
[通信作者] 韩军，副教授，博士，Tel：(0553)3932607，E-mail： aku110@ 163.com
金丝桃苷(hyperoside，Hyp)属于黄酮醇苷类化合物，又称槲皮素-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷。它广泛存在于金丝桃科、杜鹃花科、桔梗科、蔷薇科、葵科、藤黄科等多种植物的果实和全草中[1]。研究表明，金丝桃苷具有镇痛、抗氧化、保肝及对抗心肌损伤与脑缺血损伤等多种药理作用[2-3]。大脑中动脉(MCA)在脑血管中处于重要地位，其血供对脑血流量大小十分重要。当MCA发生痉挛，脑血流量会急剧减少，导致脑供血不足。如脑血管常见疾病之一脑卒中，某些类型死亡率极高，目前尚无疗效确切的药物治疗。本课题根据以前的研究，在分子生物学与细胞电生理学水平上，探讨Hyp对大鼠MCA血管内皮舒缩功能的影响及其潜在的机制。
, 百拇医药
1 材料
1.1 药物与试剂 Hyp(黄色粉末，质量分数≥96.0 %)，安徽医学研究所提供，使用前用二甲亚砜(DMSO)将其溶解，在浴槽中DMSO的终浓度为0.1%[4];水合氯醛(chloral hydrate，批号060331)，购自上海市白鹤化工厂有限公司;U46619(9，11-dideoxy-11α， 9α-epoxymethano-prostaglandin F2α，批号24894192)，左旋硝基精氨酸甲酯(N-nitro-L-arginine-methyl-ester，L-NAME，批号064K1210)，吲哚美辛(indomethacin，Indo，批号064K1207)，DL-炔丙基甘氨酸(DL-propargylglycine，PPG，批号06327DJ)，四乙胺(tetraethylammonium，TEA，批号56348)，硫氢化钠(sodium hydrosulfide，NaHS，批号06315DJ)，L-半胱氨酸(L-Cysteine，L-Cys，批号24785632)，均购自美国Sigma公司。
1.2 仪器 MPS-2多通道快速微量加药系统(武汉华中科大生命科学仪器有限公司);Powerlab计算机信号采集分析系统(澳大利亚埃德仪器有限公司);HSS-1(B)型超级恒温浴槽(四川省成都仪器厂);BT-10型恒流泵(上海市沪西分析仪器厂有限公司);XSD-100型体视显微镜(蚌埠市光学仪器厂);MO-81微电极推进器(日本 Narishige公司);Intra 767微电极放大器(美国 WPI 公司)。, 百拇医药(韩军 宣佳利 胡浩然 陈志武)
, 百拇医药
[关键词] 金丝桃苷;血管舒张;超极化;内皮源性超极化因子;硫化氢
[收稿日期] 2014-06-18
[基金项目] 国家自然科学基金项目(30840104，81173596)
[通信作者] 韩军，副教授，博士，Tel：(0553)3932607，E-mail： aku110@ 163.com
金丝桃苷(hyperoside，Hyp)属于黄酮醇苷类化合物，又称槲皮素-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷。它广泛存在于金丝桃科、杜鹃花科、桔梗科、蔷薇科、葵科、藤黄科等多种植物的果实和全草中[1]。研究表明，金丝桃苷具有镇痛、抗氧化、保肝及对抗心肌损伤与脑缺血损伤等多种药理作用[2-3]。大脑中动脉(MCA)在脑血管中处于重要地位，其血供对脑血流量大小十分重要。当MCA发生痉挛，脑血流量会急剧减少，导致脑供血不足。如脑血管常见疾病之一脑卒中，某些类型死亡率极高，目前尚无疗效确切的药物治疗。本课题根据以前的研究，在分子生物学与细胞电生理学水平上，探讨Hyp对大鼠MCA血管内皮舒缩功能的影响及其潜在的机制。
, 百拇医药
1 材料
1.1 药物与试剂 Hyp(黄色粉末，质量分数≥96.0 %)，安徽医学研究所提供，使用前用二甲亚砜(DMSO)将其溶解，在浴槽中DMSO的终浓度为0.1%[4];水合氯醛(chloral hydrate，批号060331)，购自上海市白鹤化工厂有限公司;U46619(9，11-dideoxy-11α， 9α-epoxymethano-prostaglandin F2α，批号24894192)，左旋硝基精氨酸甲酯(N-nitro-L-arginine-methyl-ester，L-NAME，批号064K1210)，吲哚美辛(indomethacin，Indo，批号064K1207)，DL-炔丙基甘氨酸(DL-propargylglycine，PPG，批号06327DJ)，四乙胺(tetraethylammonium，TEA，批号56348)，硫氢化钠(sodium hydrosulfide，NaHS，批号06315DJ)，L-半胱氨酸(L-Cysteine，L-Cys，批号24785632)，均购自美国Sigma公司。
1.2 仪器 MPS-2多通道快速微量加药系统(武汉华中科大生命科学仪器有限公司);Powerlab计算机信号采集分析系统(澳大利亚埃德仪器有限公司);HSS-1(B)型超级恒温浴槽(四川省成都仪器厂);BT-10型恒流泵(上海市沪西分析仪器厂有限公司);XSD-100型体视显微镜(蚌埠市光学仪器厂);MO-81微电极推进器(日本 Narishige公司);Intra 767微电极放大器(美国 WPI 公司)。, 百拇医药(韩军 宣佳利 胡浩然 陈志武)