银杏叶提取物对泪腺腺样囊性癌 ACC—2细胞增殖及Survivin，TIP30基因表达的影响(2)
2.2 Annexin V/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡率 取对数生长期的ACC-2细胞制成1×106个/mL细胞悬液，接种于12孔培养板中，每孔2 mL，加入EGB使其终浓度分别为0，10，40，160 mg·L-1。培养48 h后，调整待测细胞浓度为1×106个/mL，取1 mL细胞悬液，4 ℃ 1 000 r·min-1离心10 min，弃上清，加入1 mL冷PBS重悬细胞，再重复离心，弃上清，加入200 μL结合缓冲液重悬，再加入10 μL Annexin V-FITC，5 μL PI，混匀，室温避光孵育15 min，加入300 μL结合缓冲液，立即用流式细胞仪检测细胞凋亡率并分析细胞周期。2.3 RT-PCR检测Survivin和TIP30 mRNA的表达 取对数生长期的ACC-2细胞 ......
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