HPLC—DAD—ELSD同时测定知母中黄酮和皂苷类成分的含量(1)
[摘要]建立HPLC-DAD-ELSD同时测定知母中新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BⅡ、知母皂苷BⅢ、知母皂苷AⅢ 5个黄酮及皂苷类成分含量的方法。采用Merck Purospher STAR色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm);流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B)，梯度洗脱;流速1.0 mL·min-1;柱温35 ℃;检测波长为254 nm;ELSD检测器雾化气流速2.0 L·min-1;漂移管温度105 ℃;进样量10 μL。该条件下5个成分的分离度良好，标准曲线在检测范围内呈良好线性。加样回收率平均值为102.0%～104.0%，RSD为0.53%～1.8%。该方法快速、准确、重复性好，为知母药材的全面质量控制奠定了基础。
[关键词]知母;HPLC-DAD-ELSD;黄酮;皂苷;含量测定
[收稿日期]2014-10-05
[基金项目]国家“重大新药创制”科技重大专项(2012ZX09304005-002);国家自然科学基金项目(81303223);高等学校博士学科点专项科研基金项目(20133237120007);江苏省高校自然科学研究项目(13KJB360012);江苏省高校优势学科项目(2011ZYX2-003)
, 百拇医药
[通信作者]* 季德，助理研究员，研究方向中药炮制及饮片质量标准研究，E-mail：jide1982@126.com;*陆兔林，教授，研究方向为中药炮制及饮片质量标准研究，E-mail：lutuling2005@126.com
[作者简介]苏晓楠，硕士研究生，E-mail：brmoonsu@163.com
Simultaneous determination of flavones and saponins of
Rhizoma Anemarrhenae by HPLC-DAD-ELSD
SU Xiao-nan1， JI De 1，2*， ZHOU Ya-ping1， WANG Li-jun1， ZANG Wen-yi1， MAO Chun-qin1， LU Tu-lin1，2*
, 百拇医药
(1. College of Pharmacy， Nanjing University of Chinese Medicine， Nanjing 210023， China;
2.Key Research Laboratory of Chinese Medicine Processing of Jiangsu Province， Nanjing 210023， China)
[Abstract]This study is to establish an HPLC-DAD-ELSD method for simultaneous determination of 5 flavones and saponins in Rhizoma Anemarrhenae including neo-mangiferin， mangiferin， timosaponin BⅡ， timosaponin BⅢ and timosaponin AⅢ. Samples were analyzed on a Merck Purospher STAR column(4.6 mm×250 mm， 5 μm). The mobile phase consisted of acetonitrile(A) and 0.1% formic acid(B) with gradient elution at a flow rate of 1.0 mL·min-1 . The column temperature was set at 40 ℃. The DAD detector wavelength was set at 254 nm. The ELSD conditions were as follows： the nebulizing gas flow rate was 2.0 L·min-1 and temperature of drift tube was 105 ℃.The volume was 10 μL. The five compounds were well separated with good linear correlations. The mean recoveries were between 102.0%-104.0%. This method was quick and reliable which provides a foundation for quality control of R. Anemarrhenae.
, http://www.100md.com
[Key words]Rhizoma Anemarrhenae; HPLC-DAD-ELSD; flavones; saponins; content determination
doi：10.4268/cjcmm20150121
知母为百合科植物知母Anemarrhena asphodeloides Bge.的干燥根茎。苦、甘、寒。归肺、胃、肾经。清热泻火，滋阴润燥。用于外感热病，高热烦渴，肺热燥咳，骨蒸潮热，内热消渴，肠燥便秘[1]。主产于河北，山西，陕西，内蒙古，黑龙江等地。知母化学成分主要有皂苷类、黄酮类、木脂素类及多糖类等，其中皂苷类及黄酮类是知母主要活性成分，具有抗炎、抗氧化、降血糖及改善老年痴呆等作用[2]。目前有关知母药材的质量控制方法，文献报道主要有采用HPLC测定知母中芒果苷类成分的含量[3-4]，采用HPLC-ELSD测定知母皂苷类成分的含量 [5-6]或者采用HPLC-MS同时测定知母中甾体皂苷类成分的含量[7]，多针对其中一类成分进行分析。本实验采用HPLC-DAD-ELSD串联同时测定知母中新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BⅡ、知母皂苷BⅢ、知母皂苷AⅢ 5个黄酮及皂苷类成分的含量，为知母的全面质量控制提供了一种快速简便的方法。, 百拇医药(苏晓楠 季德 周亚萍 汪丽君 臧文怡 毛春芹 陆兔林)
[关键词]知母;HPLC-DAD-ELSD;黄酮;皂苷;含量测定
[收稿日期]2014-10-05
[基金项目]国家“重大新药创制”科技重大专项(2012ZX09304005-002);国家自然科学基金项目(81303223);高等学校博士学科点专项科研基金项目(20133237120007);江苏省高校自然科学研究项目(13KJB360012);江苏省高校优势学科项目(2011ZYX2-003)
, 百拇医药
[通信作者]* 季德，助理研究员，研究方向中药炮制及饮片质量标准研究，E-mail：jide1982@126.com;*陆兔林，教授，研究方向为中药炮制及饮片质量标准研究，E-mail：lutuling2005@126.com
[作者简介]苏晓楠，硕士研究生，E-mail：brmoonsu@163.com
Simultaneous determination of flavones and saponins of
Rhizoma Anemarrhenae by HPLC-DAD-ELSD
SU Xiao-nan1， JI De 1，2*， ZHOU Ya-ping1， WANG Li-jun1， ZANG Wen-yi1， MAO Chun-qin1， LU Tu-lin1，2*
, 百拇医药
(1. College of Pharmacy， Nanjing University of Chinese Medicine， Nanjing 210023， China;
2.Key Research Laboratory of Chinese Medicine Processing of Jiangsu Province， Nanjing 210023， China)
[Abstract]This study is to establish an HPLC-DAD-ELSD method for simultaneous determination of 5 flavones and saponins in Rhizoma Anemarrhenae including neo-mangiferin， mangiferin， timosaponin BⅡ， timosaponin BⅢ and timosaponin AⅢ. Samples were analyzed on a Merck Purospher STAR column(4.6 mm×250 mm， 5 μm). The mobile phase consisted of acetonitrile(A) and 0.1% formic acid(B) with gradient elution at a flow rate of 1.0 mL·min-1 . The column temperature was set at 40 ℃. The DAD detector wavelength was set at 254 nm. The ELSD conditions were as follows： the nebulizing gas flow rate was 2.0 L·min-1 and temperature of drift tube was 105 ℃.The volume was 10 μL. The five compounds were well separated with good linear correlations. The mean recoveries were between 102.0%-104.0%. This method was quick and reliable which provides a foundation for quality control of R. Anemarrhenae.
, http://www.100md.com
[Key words]Rhizoma Anemarrhenae; HPLC-DAD-ELSD; flavones; saponins; content determination
doi：10.4268/cjcmm20150121
知母为百合科植物知母Anemarrhena asphodeloides Bge.的干燥根茎。苦、甘、寒。归肺、胃、肾经。清热泻火，滋阴润燥。用于外感热病，高热烦渴，肺热燥咳，骨蒸潮热，内热消渴，肠燥便秘[1]。主产于河北，山西，陕西，内蒙古，黑龙江等地。知母化学成分主要有皂苷类、黄酮类、木脂素类及多糖类等，其中皂苷类及黄酮类是知母主要活性成分，具有抗炎、抗氧化、降血糖及改善老年痴呆等作用[2]。目前有关知母药材的质量控制方法，文献报道主要有采用HPLC测定知母中芒果苷类成分的含量[3-4]，采用HPLC-ELSD测定知母皂苷类成分的含量 [5-6]或者采用HPLC-MS同时测定知母中甾体皂苷类成分的含量[7]，多针对其中一类成分进行分析。本实验采用HPLC-DAD-ELSD串联同时测定知母中新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BⅡ、知母皂苷BⅢ、知母皂苷AⅢ 5个黄酮及皂苷类成分的含量，为知母的全面质量控制提供了一种快速简便的方法。, 百拇医药(苏晓楠 季德 周亚萍 汪丽君 臧文怡 毛春芹 陆兔林)