分别取20 μg样品，进行SDS-PAGE 电泳。电泳结束后，湿法转膜1 h，5%脱脂牛奶封闭1 h，分别孵育相应的一抗(抗体稀释度参照说明书进行)，4 ℃孵育过夜，然后分别与HRP标记的山羊抗小鼠和山羊抗兔的二抗孵育，常温摇床1 h，最后以ECL-prime试剂盒显色，暗房曝光、显影及定影。

    2.5统计分析所有数据用±s表示，采用PrismDemo 5.0统计软件进行统计分析，多组比较经One-way ANOVA Dunnett检验，P<0.05表示有统计学意义。

    3结果

    3.1ASI对IFN-γ诱导BV-2细胞NO及TNF-α生成的抑制作用Griess及ELISA检测结果显示，与空白组相比，IFN-γ能显著增加BV-2细胞NO的释放(P<0.001)，而各剂量ASI处理均能显著抑制其释放(P<0.001);与此相类似，IFN-γ刺激同样能显著促进细胞分泌TNF-α(P<0.001) ......