穿心莲内酯对白念珠菌群感效应及相关毒力基因的影响(3)
2.3.4定量分析实时荧光定量PCR分别测定目的基因CHK1,PBS2,HOG1及内参ACT1的Ct值,试验结果取其平均值。基因表达水平用倍数变化来表示(2-ΔΔCt法)。2.4统计学处理
所有数据应用SPSS17.0统计软件分析处理,计量资料以±s表示,组间差异比较采用单因素方差分析检验,P<0.05为有统计学意义。
3结果
3.1GC-MS定量检测法尼醇及酪醇的含量
3.1.1法尼醇和酪醇GC-MS色谱图GC-MS对照品检测结果:法尼醇的保留时间为9.6min左右,标准曲线方程为Y=2.3037e+6X+1.1116e+6;酪醇的保留时间为8.9min左右,标准曲线方程为Y=4.4783e+5X+2.0849e+4。样品测定结果:二者均和对照品的保留时间一致,见图1。
3.1.2GC-MS对AG干预后法尼醇和酪醇分泌量的影响AG作用白念珠菌2h后的QS分子分泌量均影响不明显。随着作用时间延长至12h,即处于白念珠菌的生长中期,2种QS分子分泌量几乎达高峰。随着菌株生长到达成熟期,QS分子分泌量均降低。AG干预后对法尼醇呈现负调节,1000mg·L-1AG可使中、晚期菌体分泌的法尼醇分别降低46%,48%,与500,250mg·L-1作用组相比均具有统计学意义(P<0.05) ......
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