2.4.1Nash比色法检测肝微粒体CYP2E1活性氨基吡啉-N-脱甲基酶(ADM)是CYP2E1的特异性催化酶，因此通过测定肝微粒体中该酶活性可反映CYP2E1活性的大小^[6]。首先通过差速离心法^[7]制备肝微粒体，BCA蛋白定量试剂盒检测其蛋白浓度。分别吸取待测肝微粒体悬液0.5mL，Hepes缓冲液0.4mL，20g·L-1氨基比林0.1mL混匀，于37℃水浴3min后加入100mmol·L-1NADPH0.01mL混匀，再次37℃水浴30min，加入12.5%三氯乙酸1.5mL混匀，7000r·min-1离心10min后，取上清，加入1mLNash试剂(15g乙酸铵，0.2mL冰醋酸，0.2mL乙酰丙酮，双蒸水补足至100mL)，混匀，于60℃水浴10min后，紫外分光光度计412nm处测定吸光度。依据甲醛标准曲线(同样采用Nash比色法绘制)求出与各试验组所测得吸光度相对应的甲醛浓度，以甲醛的生成速率表示ADM的活性 ......