基于熔解曲线分析技术的鹿茸药材分子鉴别(3)
3.3鹿茸真伪品鉴别从市场上随机选取鹿茸药材5支,在模板DNA质量浓度为 10~100 mg·L-1、引物浓度为0.2 μmol·L-1,Mg2+浓度为2.0 mmol·L-1的条件下进行熔解曲线分析,其获得的熔解曲线峰形和Tm与正品鹿茸药材熔解曲线模型一致。
随机选取3支驯鹿样品和3支白唇鹿样品,在上述相同的条件下进行熔解曲线分析,并与正品鹿茸药材熔解曲线模型进行比较,其峰形存在明显差别,见图3。
驯鹿熔解曲线为单峰,其Tm分别为(82.14±
0.07) ℃;白唇鹿熔解曲线为双峰,2峰未明显分开,其主峰Tm为(83.39±0.05) ℃。
4讨论
4.1高分辨熔解曲线技术在鹿茸药材鉴定的实现
随着分子鉴定技术的不断发展,利用DNA熔解曲线技术鉴定中药材的方法不断出现,如蒋超等利用酶切-熔解曲线分析建立了一种新的SNP分型方法并在金银花、苍术药材鉴定中应用[19]等。与前期研究者相比,本实验中采用了饱和荧光染料和更加精密的定量PCR仪 ......
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