1材料与方法

    1.1材料

    红花栽培于吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程中心基地种植，于盛开期采集花瓣，液氮处理后，保存于-80 ℃冰箱备用。

    RNA提取试剂盒(BioTeke公司)，DNA凝胶回收试剂盒、质粒提取试剂盒(Axygen公司)，反转录酶、SmarterTM RACE cDNA Amplication kit(Clontech公司)，pMD-18T Vector、限制性内切酶、T4 DNA连接酶和其他工具酶(TaKaRa公司)，PCR引物(生工生物工程(上海)技术服务有限公司和北京金唯志生物技术有限公司合成)。

    1.2方法

    1.2.1FLS特异性片段的获得红花花瓣总RNA提取采用 RNA 提取试剂盒说明书进行操作，然后用反转录酶合成cDNA第一链，以反转录cDNA为模板，根据红花花瓣转录物组测序结果，挑选FLS的候选基因，设计特异性引物，SP：5′-GGGGCATCTTTCAAGTGGTA-3′ ......