萜烯类经皮促透剂对皮肤活性表皮层的影响及其机制研究(3)
2.5细胞内Ca2+-ATP酶活性的测定将HaCaT细胞接种于25 mL培养瓶内,并设置空白组(正常培养基)、对照组(含1% DMSO培养基)、萜烯类促透剂及氮酮药物处理组(以1% DMSO培养基溶解各药物),待细胞贴壁后12 h分别加入对应的药物后孵育24 h。然后将HaCaT细胞消化、离心,弃上清液,用适量生理盐水混匀,并调整每组细胞数量约为4.5×106个/mL。采用匀浆器充分研磨破碎细胞,利用超微量Ca2+-ATP酶测试盒进行测定,同时采用考马斯亮兰试剂盒测定细胞中的蛋白含量,计算 Ca2+-ATP 酶的活性。2.6数据处理采用SPSS 16.0统计分析软件处理数据,组间差异的比较采用t检验。
3结果
3.1萜烯类促透剂对HaCaT细胞的增殖活性研究不同浓度萜烯类促透剂和阳性促透剂氮酮对HaCaT角质形成细胞存活率的影响大致呈浓度依赖性关系(图1),根据细胞存活率计算各萜烯类促透剂和氮酮的半数抑制率。6种萜烯类促透剂相对于常用化学促透剂氮酮细胞毒性均较低(表1),提示天然的萜烯类经皮促透剂与化学合成促透剂相比可能具有较低的皮肤刺激性 ......
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