一株拟茎点霉属中新的色原烯及其肿瘤细胞抑制活性研究(1)
[摘要]为了研究拟茎点霉属真菌HCCB03519的大米发酵产物的肿瘤细胞抑制活性成分，对其进行了化学研究和肿瘤细胞抑制活性分析。从其乙酸乙酯浸提部分分离得到7个化合物，经波谱数据分析，鉴定为phomochromene(1)，6-羟基蜂蜜曲霉素(2)，6-羟基-5-甲基蜂蜜曲霉素(3)，nectriapyrone(4)，chermesinone A(5)， chermesinone B(6)，pomopxanthone A(7)，其中化合物1为一个新的色原烯，化合物5和6为首次在拟茎点霉属中发现。肿瘤抑制活性分析表明，化合物1～6对各个肿瘤细胞的抑制活性较低，化合物7具有较强的抑制活性，比阳性对照5-Fu的抑制活性高。
[关键词]拟茎点霉属;色原烯;肿瘤细胞抑制活性
A novel chromene with anti-tumor activities from
fungus Phomopsis sp.
, http://www.100md.com
YANG Zhi-jun1 ， YIN Yu1， GE Mei2*
(1. School of Pharmacy， Shanghai Jiaotong University， Shanghai 200040， China;
2. Shanghai Health Creation Center for Biopharmaceuticals R&D， Shanghai 200240， China)
[Abstract]A new chromene (1) and six known compounds identified as 6-hydroxymellein(2)， 6-hydroxy-5-methylmellein(3)， nectriapyrone(4)， chermesinone A(5)， chermesinone B(6)， and pomopxanthone A(7)， were isolated in our investigation of the cytotoxic constituents from the fermented rice substrate of endophytic fungus Phomopsis sp. HCCB03519. The structures of these compounds were elucidated through spectroscopic data analysis. All compounds exhibited inhibitory activities against cancer cell lines. Compound 7 showed stronger inhibition against cancer cells than the positive control 5-Fu.
, 百拇医药
[Key words]Phomopsis sp.; phomochromene; anti-tumor activity
doi：10.4268/cjcmm20150418
药用植物内生真菌由于生长在植物细胞间隙这种特殊的环境以及长期与植物共同进化，决定了其次生代谢产物结构与活性的多样性，因而有大量的结构复杂多样、生物活性广泛的次生代谢产物不断被发现[1]。拟茎点霉属Phomopsis为半知菌亚门腔孢纲的一个大属，是一种重要的植物病原真菌，由于拟茎点霉属没有宿主特异性，因此在许多植物中都分离到了该真菌菌属[2]。从拟茎点霉属中分离得到多种类型的化合物，具有多种的生物学活性[3-6]。在一株拟茎点霉属Phomopsis sp.真菌的发酵产物中，发现了1个新的色原烯化合物phomochromen(1)和7个已知化合物2～7(图1)，它们都具有一定的肿瘤细胞抑制活性。
, 百拇医药
1材料与方法
1.1仪器与试剂Bruker Avance II-400型超导核磁共振仪，TMS为内标;Q-Tofmicro磁式质谱仪(Waters公司);JASCO P2000 旋光仪，J-815 CD光谱仪(日本分光株式会社);1100型高效液相色谱仪(Agilent公司);戴安液相色谱仪P680(DIONEX公司);Heidoldf Laborata-4000旋转蒸发仪;Sephadex LH20(Phamacia公司);薄层色谱硅胶G板和柱色谱硅胶300～400目(青岛海洋化工厂);显色剂为10%硫酸-乙醇;溶液除了分析和制备用的色谱级甲醇外，其他试剂均为分析纯;MTT细胞增殖抑制活性检测试剂盒(碧云天)。
1.2菌株和细胞菌株HCCB03519是2008年2月从安徽省南陵县的药用植物牛膝的茎中分离得到内生真菌，鉴定为拟茎点霉属真菌(Genbank no HQ688988.1);肿瘤细胞株为A549(非小细胞肺癌细胞)，MDA-MB-231(人乳腺癌细胞)，MCF-7(人乳腺癌细胞)PANC-1(人胰腺癌细胞)，AsPC-1(人转移胰腺腺癌细胞)，BxPC-3(人原位胰腺腺癌细胞)和BEL-7402(人肝癌细胞)，上述菌株及细胞株均保藏于上海来益生物药物研究开发中心。
1.3培养基斜面培养基：PDA; 种子培养基：黄豆粉20 g，玉米粉10 g，葡萄糖10 g，KH2PO4 1 g，水1 000 mL，pH自然;发酵培养基：大米。发酵过程：将冻干管种子接种于斜面培养基中，28 ℃恒温培养6 d后，采用挖块法将培养好的斜面接种到种子培养基中，28 ℃，220 r·min-1摇床培养3 d;将培养好的种子以10%的接种量接种于大米培养基中，28 ℃静置培养30 d。, 百拇医药(杨志钧 殷瑜 戈梅)
[关键词]拟茎点霉属;色原烯;肿瘤细胞抑制活性
A novel chromene with anti-tumor activities from
fungus Phomopsis sp.
, http://www.100md.com
YANG Zhi-jun1 ， YIN Yu1， GE Mei2*
(1. School of Pharmacy， Shanghai Jiaotong University， Shanghai 200040， China;
2. Shanghai Health Creation Center for Biopharmaceuticals R&D， Shanghai 200240， China)
[Abstract]A new chromene (1) and six known compounds identified as 6-hydroxymellein(2)， 6-hydroxy-5-methylmellein(3)， nectriapyrone(4)， chermesinone A(5)， chermesinone B(6)， and pomopxanthone A(7)， were isolated in our investigation of the cytotoxic constituents from the fermented rice substrate of endophytic fungus Phomopsis sp. HCCB03519. The structures of these compounds were elucidated through spectroscopic data analysis. All compounds exhibited inhibitory activities against cancer cell lines. Compound 7 showed stronger inhibition against cancer cells than the positive control 5-Fu.
, 百拇医药
[Key words]Phomopsis sp.; phomochromene; anti-tumor activity
doi：10.4268/cjcmm20150418
药用植物内生真菌由于生长在植物细胞间隙这种特殊的环境以及长期与植物共同进化，决定了其次生代谢产物结构与活性的多样性，因而有大量的结构复杂多样、生物活性广泛的次生代谢产物不断被发现[1]。拟茎点霉属Phomopsis为半知菌亚门腔孢纲的一个大属，是一种重要的植物病原真菌，由于拟茎点霉属没有宿主特异性，因此在许多植物中都分离到了该真菌菌属[2]。从拟茎点霉属中分离得到多种类型的化合物，具有多种的生物学活性[3-6]。在一株拟茎点霉属Phomopsis sp.真菌的发酵产物中，发现了1个新的色原烯化合物phomochromen(1)和7个已知化合物2～7(图1)，它们都具有一定的肿瘤细胞抑制活性。
, 百拇医药
1材料与方法
1.1仪器与试剂Bruker Avance II-400型超导核磁共振仪，TMS为内标;Q-Tofmicro磁式质谱仪(Waters公司);JASCO P2000 旋光仪，J-815 CD光谱仪(日本分光株式会社);1100型高效液相色谱仪(Agilent公司);戴安液相色谱仪P680(DIONEX公司);Heidoldf Laborata-4000旋转蒸发仪;Sephadex LH20(Phamacia公司);薄层色谱硅胶G板和柱色谱硅胶300～400目(青岛海洋化工厂);显色剂为10%硫酸-乙醇;溶液除了分析和制备用的色谱级甲醇外，其他试剂均为分析纯;MTT细胞增殖抑制活性检测试剂盒(碧云天)。
1.2菌株和细胞菌株HCCB03519是2008年2月从安徽省南陵县的药用植物牛膝的茎中分离得到内生真菌，鉴定为拟茎点霉属真菌(Genbank no HQ688988.1);肿瘤细胞株为A549(非小细胞肺癌细胞)，MDA-MB-231(人乳腺癌细胞)，MCF-7(人乳腺癌细胞)PANC-1(人胰腺癌细胞)，AsPC-1(人转移胰腺腺癌细胞)，BxPC-3(人原位胰腺腺癌细胞)和BEL-7402(人肝癌细胞)，上述菌株及细胞株均保藏于上海来益生物药物研究开发中心。
1.3培养基斜面培养基：PDA; 种子培养基：黄豆粉20 g，玉米粉10 g，葡萄糖10 g，KH2PO4 1 g，水1 000 mL，pH自然;发酵培养基：大米。发酵过程：将冻干管种子接种于斜面培养基中，28 ℃恒温培养6 d后，采用挖块法将培养好的斜面接种到种子培养基中，28 ℃，220 r·min-1摇床培养3 d;将培养好的种子以10%的接种量接种于大米培养基中，28 ℃静置培养30 d。, 百拇医药(杨志钧 殷瑜 戈梅)