4体外抑制肿瘤细胞增殖实验

    取对数生长期的肿瘤细胞，制成2×104～3×104 个/mL单细胞悬液，接种于96孔板，每孔100 μL，每组设3个平行孔，37 ℃，5%CO2培养箱培养，培养24 h后加入待测化合物溶液，固定浓度40 μmol·L-1初筛，在该浓度对肿瘤细胞生长抑制在50%附近的化合物设5个浓度进入梯度复筛。另设阴性对照组，继续培养72 h。实验终止前4 h，每孔加入浓度为1 g·L-1的MTT 50 μL，4～6 h后，弃去培养液，加DMSO 100 mL/孔，震荡5 min，待结晶溶解后用酶标仪于570 nm波长测定A值。按以下公式计算肿瘤细胞抑制率：抑制率(%)=(1-实验组平均A值/对照组平均A值)×100% ......