中药复方PC—SPES Ⅱ抑制人前列腺癌细胞LNCaP增殖及其对AR, PSA表达的影响(3)
2.4 流式细胞仪检测细胞周期分布 取对数生长期的LNCaP细胞经胰酶消化后, 以5×105个/孔的细胞数接种于6孔板中,每孔2 mL。待细胞贴壁后,阴性对照组加入含0.1%乙醇的培养液,实验组加入终质量浓度为240 mg·L-1 PC-SPES Ⅱ,分别于37 ℃,5%CO2培养箱中培养0,12,24,48 h后,消化收集细胞,用预冷PBS洗1次,加入预冷70%乙醇固定细胞,4 ℃过夜。离心弃上清,用预冷PBS洗1次,加入0.5 mL PI/RNase Staining Buffer,室温孵育15 min。使用流式细胞仪检测细胞周期分布。2.5 Hoechst 33258染色观察凋亡细胞形态 取对数生长期的LNCaP细胞经胰酶消化后, 以1×105个/孔的细胞数接种于24孔板中 ......
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