亲和色谱应用于天然活性成分筛选的研究进展(3)
将固定化酶技术与色谱技术以及MS联用,在筛选天然药物活性成分方面有着广泛的应用。黄燕等[13]将ACE固定在壳聚糖微球载体上,制备ACE亲和色谱柱。结合高效液相快速筛选复杂体系中的ACE抑制剂。应用赖诺普利等5种已上市的ACEI对筛选模型进行验证,反映方法具有高度选择性。将此模型应用于中药地龙及山楂筛选,得到5个具有抑制ACE酶活性的有效成分,且具有重现性。Yunfang Li[8]等将α-淀粉酶包覆在磁性纳米粒子表面,作为色谱柱固定相,建立亲和色谱系统,与MS联用,从天然药物大叶藤黄中筛选α-淀粉酶抑制剂。筛选出的3种双黄酮类化合物,进一步结合UV,MS和NMR谱而确定了结构。将酶作为固定相,与色谱技术联用,在天然药物活性成分筛选方面具有相当大的优势。游离酶经固定化后保存时间大大增加,对酸、碱、热以及有机溶剂的耐受增加,为不同溶解性质以及提取方式的天然药物的筛选提供了可能,扩大了筛选范围。以酶为配基的亲和色谱筛选系统具有灵敏,高效,特异性强,可重复利用等优点,逐渐成为天然药物高通量筛选不可或缺的重要工具。然而,以酶为亲和配基的色谱筛选系统存在一定的问题,酶的固定化过程不改变酶的一级结构,却可能改变酶的空间结构 ......
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