丹参叶片内生真菌群落结构及其与有效成分相关性分析(2)
1材料与方法
1.1样品的采集和处理
2011年8月,从中国4个省:山东临沂市(E 117°38′38″,N 35°32′36″)、安徽六安市(E 115°48′34″,N 31°11′51″)、湖北黄冈市(E 115°24′30″,N 30°49′19″)、河南南阳市(E 111°51′24″,N 33°6′11″)、河南三门峡市(E 111°27′59″,N 34°6′51″),5个主要丹参分布区采集生长良好的野生丹参样品,样品分别命名为SD01,AH87,HUB5,HEN5,HEN7。丹参材料采集后部分样品依次用0.5%次氯酸钠表面消毒1 min,75%乙醇处理1 min、无菌水冲洗、无菌滤纸擦干表面水分后,-80 ℃保存,用于内生真菌群落结构研究。丹参部分样品采集后40 ℃烘干,粉碎,过40目筛,4 ℃保存用作有效成分研究。试验植物样品经中国科学院上海辰山植物园魏宇昆高级工程师鉴定,其原植物均为S. miltiorrhiza。
1.2叶片内生真菌基因组DNA的提取及变性梯度凝胶电泳(DGGE分析)
采用改进的CTAB法[7]提取不同产地丹参叶片总DNA ......
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1.1样品的采集和处理
2011年8月,从中国4个省:山东临沂市(E 117°38′38″,N 35°32′36″)、安徽六安市(E 115°48′34″,N 31°11′51″)、湖北黄冈市(E 115°24′30″,N 30°49′19″)、河南南阳市(E 111°51′24″,N 33°6′11″)、河南三门峡市(E 111°27′59″,N 34°6′51″),5个主要丹参分布区采集生长良好的野生丹参样品,样品分别命名为SD01,AH87,HUB5,HEN5,HEN7。丹参材料采集后部分样品依次用0.5%次氯酸钠表面消毒1 min,75%乙醇处理1 min、无菌水冲洗、无菌滤纸擦干表面水分后,-80 ℃保存,用于内生真菌群落结构研究。丹参部分样品采集后40 ℃烘干,粉碎,过40目筛,4 ℃保存用作有效成分研究。试验植物样品经中国科学院上海辰山植物园魏宇昆高级工程师鉴定,其原植物均为S. miltiorrhiza。
1.2叶片内生真菌基因组DNA的提取及变性梯度凝胶电泳(DGGE分析)
采用改进的CTAB法[7]提取不同产地丹参叶片总DNA ......
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