小分子单克隆抗体的制备与敲除技术研究进展(2)
2.1含有羧基的半抗原
2.1.1碳二亚胺法碳二亚胺法是将中药小分子先与碳二亚胺反应，使羧基脱水，生成一个加成中间产物，再与载体蛋白上的氨基反应形成酰胺键。张庆华等[4]将小分子的药物恩诺沙星EF和鸡血清白蛋白(OVA)以及牛血清白蛋白(BSA)采用碳二亚胺法的偶联方法合成完全抗原，通过紫外特征光谱和抗血清效价对完全抗原的合成效果进行分析。BSA采用碳二亚胺法效果更好，未经EDA处理的BSA和碳二亚胺法合成的偶联物的结合比分别为205，308。血清效价检测发现，以BSAEF为完全抗原的效价为25 600，以OVAEF为完全抗原的效价为6 400，这表明完全抗原的合成是成功的。
2.1.2活化酯法活化酯法是指含有羧基的半抗原或药物在二环己基碳二亚胺(DCC)的作用下，与NHS反应，生成活泼酯衍生物，后者与载体蛋白上的氨基反应，形成以酰胺键连接的耦合物。魏新林等[5]基于农药小分子人工抗原设计合成的基本原则，以氰戊菊酯的特征菊酸部分——氰戊菊酸作为半抗原，采用活性酯法与载体蛋白BSA偶联合成了氰戊菊酯免疫特异性人T结合抗原。薛添等[6]采用N羟基琥珀酰亚胺活性酯(NHS)法制备AMXOVA(免疫原)AMXBSA(检测抗原)合成阿莫西林(AMX)完全抗原，获得稳定、高效分泌抗AMX单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株 ......
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2.1.1碳二亚胺法碳二亚胺法是将中药小分子先与碳二亚胺反应，使羧基脱水，生成一个加成中间产物，再与载体蛋白上的氨基反应形成酰胺键。张庆华等[4]将小分子的药物恩诺沙星EF和鸡血清白蛋白(OVA)以及牛血清白蛋白(BSA)采用碳二亚胺法的偶联方法合成完全抗原，通过紫外特征光谱和抗血清效价对完全抗原的合成效果进行分析。BSA采用碳二亚胺法效果更好，未经EDA处理的BSA和碳二亚胺法合成的偶联物的结合比分别为205，308。血清效价检测发现，以BSAEF为完全抗原的效价为25 600，以OVAEF为完全抗原的效价为6 400，这表明完全抗原的合成是成功的。
2.1.2活化酯法活化酯法是指含有羧基的半抗原或药物在二环己基碳二亚胺(DCC)的作用下，与NHS反应，生成活泼酯衍生物，后者与载体蛋白上的氨基反应，形成以酰胺键连接的耦合物。魏新林等[5]基于农药小分子人工抗原设计合成的基本原则，以氰戊菊酯的特征菊酸部分——氰戊菊酸作为半抗原，采用活性酯法与载体蛋白BSA偶联合成了氰戊菊酯免疫特异性人T结合抗原。薛添等[6]采用N羟基琥珀酰亚胺活性酯(NHS)法制备AMXOVA(免疫原)AMXBSA(检测抗原)合成阿莫西林(AMX)完全抗原，获得稳定、高效分泌抗AMX单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株 ......
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