小分子单克隆抗体的制备与敲除技术研究进展(3)
3.1.2色谱主要为薄层色谱法薄层色谱法是指分别取半抗原,载体蛋白和人工抗原点于同一薄层色谱硅胶板上,用展开剂展开,待展开剂前沿离顶端约1 cm附近时,再在适宜的条件下用显色剂显色。以观察三者的不同显色特性来鉴别人工抗原是否合成成功。王欢等[23]用薄层色谱法鉴定,成功合成了桔梗皂苷D(PD)人工免疫原和包被原。
3.1.3动物免疫法动物免疫法是指将人工抗原直接免疫动物,使之产生抗体,然后使用ELISA法测试其效价,从而达到鉴定的目的。吴扬等[20]采用此法,用草丁膦人工抗原免疫小鼠数周后在其血清中检测出抗体(其血清的效价为1∶320 000)由此判断了草丁磷人工抗原合成及对小鼠的免疫成功。
3.1.4质谱法基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱是质谱方法的一种,其主要特点是采用特殊的电离方式,使待测物分散在小分子基质中,通过激光激发基质,使待测物离子化并离开基质,之后通过飞行时间质谱(TOFMS)测定其相对分子质量。蔡碧双等[24]将甘草酸GA与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)偶联起来制得完全抗原后,经基质辅助激光解吸飞行时间质谱鉴定其相对分子质量。结果合成的人工抗原GABSA 中GA与BSA的结合比约为7∶1 ......
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3.1.3动物免疫法动物免疫法是指将人工抗原直接免疫动物,使之产生抗体,然后使用ELISA法测试其效价,从而达到鉴定的目的。吴扬等[20]采用此法,用草丁膦人工抗原免疫小鼠数周后在其血清中检测出抗体(其血清的效价为1∶320 000)由此判断了草丁磷人工抗原合成及对小鼠的免疫成功。
3.1.4质谱法基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱是质谱方法的一种,其主要特点是采用特殊的电离方式,使待测物分散在小分子基质中,通过激光激发基质,使待测物离子化并离开基质,之后通过飞行时间质谱(TOFMS)测定其相对分子质量。蔡碧双等[24]将甘草酸GA与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)偶联起来制得完全抗原后,经基质辅助激光解吸飞行时间质谱鉴定其相对分子质量。结果合成的人工抗原GABSA 中GA与BSA的结合比约为7∶1 ......
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