穿心莲八氢番茄红素脱氢酶ApPDS的基因克隆及功能鉴定(2)
1材料
1.1植物本实验所用的植物材料为穿心莲A paniculata，穿心莲种子来源于广州，是当地的栽培品种，由四川农业大学王强教授完成鉴定。种植在气候室，生长条件昼夜14 h/10 h，温度28 ℃/25 ℃。
1.2试剂MMLV反转录酶，高保真酶，Taq DNA聚合酶，核酸分子质量标准，限制性内切酶，T4DNA连接酶，dNTP均购自大连宝生物工程公司；大肠杆菌Escherichia coli感受态细胞TOP10，质粒小提试剂盒，pGEMT克隆试剂盒，胶回收纯化试剂盒购自北京天根生化公司；引物由Invitrogen公司合成；基因测序由上海美吉生物医药公司完成；烟草脆裂病毒pTRV1和pTRV2购买自美国ABRC，其他常规化学试剂均为分析纯。
2方法
2.1ApPDS全长cDNA的克隆使用植物总RNA提取试剂提取穿心莲叶片总RNA，以Oligo(dT)为引物，用Reverse Transcriptase MMLV酶反转录合成cDNA第一链 ......
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1.1植物本实验所用的植物材料为穿心莲A paniculata，穿心莲种子来源于广州，是当地的栽培品种，由四川农业大学王强教授完成鉴定。种植在气候室，生长条件昼夜14 h/10 h，温度28 ℃/25 ℃。
1.2试剂MMLV反转录酶，高保真酶，Taq DNA聚合酶，核酸分子质量标准，限制性内切酶，T4DNA连接酶，dNTP均购自大连宝生物工程公司；大肠杆菌Escherichia coli感受态细胞TOP10，质粒小提试剂盒，pGEMT克隆试剂盒，胶回收纯化试剂盒购自北京天根生化公司；引物由Invitrogen公司合成；基因测序由上海美吉生物医药公司完成；烟草脆裂病毒pTRV1和pTRV2购买自美国ABRC，其他常规化学试剂均为分析纯。
2方法
2.1ApPDS全长cDNA的克隆使用植物总RNA提取试剂提取穿心莲叶片总RNA，以Oligo(dT)为引物，用Reverse Transcriptase MMLV酶反转录合成cDNA第一链 ......
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