穿心莲八氢番茄红素脱氢酶ApPDS的基因克隆及功能鉴定(1)
[摘要]采用RTPCR和RACE技术从穿心莲植株中克隆得到了八氢番茄红素脱氢酶(PDS)的全长cDNA，预测有一个1 752 bp的完整开放阅读框(序列已登录GenBank，登录号KP982892)，编码584个氨基酸。序列同源性分析，穿心莲PDS编码的氨基酸序列与芝麻、广藿香、黄芩等其他植物的PDS有很高的同源性，该蛋白包含一个共有的氨基酸脱氢酶的辅酶结构域NAD(H)binding domain。利用半定量RTPCR技术进行组织表达模式分析，发现PDS基因在穿心莲的根、茎、叶、花中均有表达，表达量为叶﹥花﹥茎﹥根。用病毒诱导基因沉默(VIGS)的方法在穿心功莲体内鉴定ApPDS的功能，构建VIGS载体pTRV2PDS，经农杆菌浸染穿心莲叶片，植物表型观察、定量RTPCR检测ApPDS基因的表达，结果观察到叶片轻微变黄和明显的基因下调，鉴定了ApPDS在体内的功能 ......
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