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编号:12730703
腊梅葡萄糖—6—磷酸脱氢酶G6PDH1)基因的克隆及表达分析(2)
http://www.100md.com 2015年11月1日 《中国中药杂志》2015年第21期
     腊梅Chimonanthus praecox为腊梅科腊梅属植物,落叶灌木,多分枝,特产于我国[11]。腊梅的花、茎和根均能够入药,用于治疗感冒、解热镇痛、止咳化痰、降压和改善免疫系统,功效显著[12]。同时腊梅植物的叶和花都散发香气,是我国传统的庭院名花和园林绿化植物,百花凋零的隆冬开放,具有色、香、形、姿、韵俱佳的观赏价值[11]。目前G6PDH基因在模式植物拟南芥及农作物中报道比较多,但是关于腊梅的G6PDH基因的研究目前还未见报道。本研究利用简并引物和RACE技术,从腊梅花中成功克隆了G6PDH1基因全长,并分析其在不同组织中及冷处理下的表达特异性,为后续深入研究腊梅的抗寒机制奠定基础。

    1 材料

    实验材料及处理利用北京中医药大学栽培的腊梅根、茎、及花提取RNA。将植物花进行冷处理(4 ℃),分别于处理后的0,4,8,12,16,20,24 h取样,提取总RNA,检测G6PDH1在冷胁迫条件下的表达差异。

    2 方法

    2.1 腊梅总RNA的提取和cDNA合成

    利用RNA提取纯化试剂盒(博迈德,中国)提取总RNA,利用NanoDrop 2000C检测RNA浓度 ......
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