基于甲型H1N1流感病毒致MDCK细胞损伤保护作用的双黄连组方HPLC特征图谱谱效关系研究(3)
2.2.2 不同组方双黄连对MDCK细胞毒性的测定
将长成单层MDCK细胞的96孔培养板，弃去旧培养液。①正常细胞对照组：加入不含药物的1640培养液。②阳性药组：用含10%小牛血清的1640培养液将利巴韦林配制成1 g·L-1，设6个复孔，每孔0.1 mL。③药液组：取2.1.2项下制备的提取液，按表1中9个处方比例混合后用含10%小牛血清的1640培养液以1∶2逐级稀释，每个浓度6个孔，每孔0.1 mL加入培养板。将培养板移入37 ℃，5%CO2培养箱中培养。每天观察并记录细胞病变程度(CPE)，药液组与正常组相比无明显差异。并在48 h后采用MTT染色法，酶标仪在波长540 nm处测定各孔A，并计算细胞存活率：存活率[18]=A给药/A正常对照×100%。阳性药组细胞存活率为(88.63±11.97)%，各处方组细胞存活率见图3，结果显示各处方以1∶32稀释后细胞存活率均大于80% ......
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将长成单层MDCK细胞的96孔培养板，弃去旧培养液。①正常细胞对照组：加入不含药物的1640培养液。②阳性药组：用含10%小牛血清的1640培养液将利巴韦林配制成1 g·L-1，设6个复孔，每孔0.1 mL。③药液组：取2.1.2项下制备的提取液，按表1中9个处方比例混合后用含10%小牛血清的1640培养液以1∶2逐级稀释，每个浓度6个孔，每孔0.1 mL加入培养板。将培养板移入37 ℃，5%CO2培养箱中培养。每天观察并记录细胞病变程度(CPE)，药液组与正常组相比无明显差异。并在48 h后采用MTT染色法，酶标仪在波长540 nm处测定各孔A，并计算细胞存活率：存活率[18]=A给药/A正常对照×100%。阳性药组细胞存活率为(88.63±11.97)%，各处方组细胞存活率见图3，结果显示各处方以1∶32稀释后细胞存活率均大于80% ......
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