多伦赤芍野生植株和芽头无性栽培植株生物学性状和芍药苷含量对比研究(2)
2 方法2.1 生物量测定
将烘干的赤芍茎、叶、根颈、肉质根和细根用百分之一电子天平分别进行称重。
2.2 根系解剖结构的测定
每个植株取3~5个经FAA固定液固定后的根段,经酒精脱水、二甲苯透明后,用石蜡包埋,将包埋好的蜡块修理成梯形(中央有根段)后进行切片(厚度为6 μm),展片,经番红-固绿染色后,制成永久性切片。用与相机相连的显微镜查看切片并拍照,图片用Image J测量根系的解剖结构,包括根系直径、维管柱直径、皮层厚度,并计算维管柱所占比例、皮层所占比例,维管柱、皮层比。
2.3 芍药苷含量测定
2.3.1 色谱条件 用高效液相色谱仪(HPLC)对赤芍根中的芍药苷含量进行测定,色谱柱为Agilent TC- C18(4.6 mm × 250 mm,5 μm);流动相为甲醇(A)-0.05%磷酸二氢钾溶液(B)(40∶60),流速 1 mL·min-1,柱温 25 ℃;洗脱时间 20 min,进样量 10 μL。检测器为紫外检测器,检测波长 230 nm。
2.3.2 对照品溶液的制备 取经五氧化磷减压干燥器中干燥36 h的芍药苷对照品适量 ......
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