2.7.2 霉变样品的含量测定 分别按照2.5及2.6项下方法对控制组与侵染组霉变前、霉变后样品进行4种黄酮类成分及总黄酮成分进行含量测定。

    2.8 陈皮表面侵染真菌的分离与显微鉴定

    本实验对8批次陈皮样品进行了侵染真菌的分离和显微鉴别，结果分离到了25株菌株，分属于2属5种，均属于青霉属与曲霉属二类，分别为普通青霉、朱黄青霉、桔青霉、黄曲霉和黑曲霉，其中优势菌为黑曲霉，部分菌株的形态及其显微图见图1。8批次陈皮样品均受到真菌的侵染，侵染率为100%，不同批次样品侵染真菌数为2～4株，桔青霉与普通青霉为所有样品共有侵染真菌，各批次样品受侵染真菌类型相似度较高见表2。此外，有6批次样品侵染黑曲霉，2批次样品侵染黄曲霉，1批次样品侵染朱黄青霉。由实验结果可知，陈皮样品受真菌侵染类群较为固定，主要为青霉属与曲霉属二类，桔青霉与普通青霉为共有侵染真菌，黑曲霉、朱黄青霉、黄曲霉为差异侵染真菌。

    2.9 陈皮表面侵染真菌的分子鉴定

    由于普通青霉、桔青霉、朱黄青霉在显微结构相似度较大，为了更准确鉴定青霉属真菌，本实验对各批次样品中分离出的25株真菌进行DNA提取，PCR扩增及测序实验。所有真菌菌株DNA提取、PCR扩增并测序成功，将测序结果进行Blast检索，结果表明，25株真菌均属于青霉属或曲霉属。同时构建邻(neighbor-joining，NJ)系统发育树可以很好的区别各株真菌，普通青霉、桔青霉、黑曲霉、朱黄青霉与黄曲霉与相应NCBI下载序列聚为一支 ......