凤丹内生菌的分离鉴定及抑菌活性研究

http://www.100md.com 2016年1月1日 《中国中药杂志》2016年第1期

     [关键词]凤丹：内生菌：分离：鉴定：抑菌性

    内生菌(endophyte)广泛存在于植物各器官、组织的细胞内及细胞间隙，具有丰富的宿主植物种类多样性、在宿主植物组织中分布多样性以及功能多样性的特点，国内外相关研究报道很多，但未见道地药材基原凤丹的内生菌研究报道。鉴于植物内生菌种类很大程度上受制于植物本身的生理特点和周边的环境，而中药材又历来重视道地性，本研究对凤丹根部内生菌进行分离、鉴定和抑菌实验研究，在为生产实践服务的同时也为道地药材凤丹的研究积累科学资料

    1材料与方法

    1.1供试样品

    2012年7—10月，在凤丹的果期和地上部分渐枯期，选择安徽铜陵顺安正常生长的三年生植株，参考平行线取样法，开挖30～40 cm的土壤剖面，去除表层土后收集根样：采集的根样用锡箔纸包裹好带回实验室置放4℃冰箱备用。

    按常规方法准备牛肉膏蛋白胨固体培养基(NA)、马铃薯葡萄糖固体培养基(PDA)；液体发酵培养基为上述培养基不加琼脂

    1.2内生菌分离与纯化

    取凤丹根样洗净，晾干并进行表面消毒.取200 μL最后一次冲洗液涂布至相应平板中，检测表面消毒效果

    在无菌状态下将处理完毕后的凤丹根样品切成0.2 cm×0.2 cm长段(片)置于PDA培养基、28℃下静置培养5～10d ......