白木香AsJAZ1基因原核载体的构建与表达(2)
2.3 原核表达载体pET-28a-AsJAZ1的构建 将测序后目的基因序列正确的pGM-T-AsJAZ1质粒和pET-28a载体质粒分别用BamH I和Xho I进行双酶切，回收目的片段后，利用T4连接酶16℃连接过夜，将连接产物转化E.coli TOP10后，均匀涂布在含有Kan(50mg.L-1)的LB固体培养基中，37℃倒置培养12～16h。经菌液PCR和酶切鉴定为阳性的pET-28a-AsJAZ1质粒转化到E.coli B121(DE3)中进行表达。
2.4 AsJAZ1基因的原核表达 将含有重组质粒pET-28a-AsJAZ1的E.coli B121(DE3)阳性克隆振荡培养过夜，菌液以1：50稀释于含有Kan(50mg·L-1)的LB液体培养基中，37℃培养至A600≈0.6时，加入IVFG至终浓度为1mmol·L-1 ......
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2.4 AsJAZ1基因的原核表达 将含有重组质粒pET-28a-AsJAZ1的E.coli B121(DE3)阳性克隆振荡培养过夜，菌液以1：50稀释于含有Kan(50mg·L-1)的LB液体培养基中，37℃培养至A600≈0.6时，加入IVFG至终浓度为1mmol·L-1 ......
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