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编号:12969870
中药新配方景丹胰敏剂治疗代谢综合征的方剂研究(2)
http://www.100md.com 2016年1月15日 《中国中药杂志》2016年第2期
     利用BL21 Escherichia coli大肠杆菌扩增基因重组人PTP1B蛋白,并应用GST亲和色谱柱纯化PTP1B蛋白。以硝基磷酸盐为底物,进行PTPlB的酶学反应,观察药物对PTP1B蛋白活性的影响。

    化学物质p-nitrophenyl-alpha-D-glucopyranoside(PNPG)经α-葡萄糖苷酶催化生成葡萄糖和p-nitro-pheny,后者可在400nm处有最大吸收峰。根据此原理,以PNPG为底物,检测样品对α-葡萄糖苷酶活性的影响。

    采用GDH(甘油酸脱氢酶)法测定GFAT酶活性。

    2.4 统计学方法 实验数据以x±s表示。正交试验采用SAS软件ANOVA Procedure方法进行方差分析。组间比较应用SPSS 13.0软件,采用One-way ANOVA进行统计学处理。P<0.05认为有统计学意义。

    3 结果

    3.1 药材及其提取部位的选择 以对PTPlB酶的抑制活性为标准选择不同产地及种类的红景天。结果显示,产于西藏的大花红景天为最佳药材(表1)。

    以西藏的大花红景天为原材料,经不同制备工艺得到17个样品。分别考察其抑制PTPlB活性和α-葡萄糖苷酶活性。结果显示,样品H13对2个靶点的相对作用较强,被选为方剂组分(表2)。

    应用高脂饮食诱导的肥胖合并高胆固醇血症的IRF小鼠模型,将不同来源、不同制备工艺得到的蛹虫草提取部位,按折合生药量1g·kg-1的剂量灌胃给药 ......
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