基于HK—2细胞的泽泻萜类组分体外肾毒性评价及其诱导细胞凋亡作用的探究(2)

http://www.100md.com 2016年2月1日 中国中药杂志2016年第3期

     2.1.1泽泻提取浓缩泽泻粉碎，称取200 g泽泻粉末，以10倍量80%乙醇煮沸30 min，过滤液为1液；药渣加10倍量80%乙醇再煮沸30 min，过滤液为2液，合并1和2液，减压热浓缩至400 mL。

    2.1.2分离纯化本实验用AB-8大孔树脂对泽泻萜类组分进行纯化^[11]。取一定量的AB-8大孔树脂，加入95%乙醇浸泡48 h，使之充分溶胀，然后装柱(边加边搅拌缓慢加入)。接着用95%乙醇淋洗，直至流出液在试管中用等体积的水溶解后不再有浑浊的现象，最后用蒸馏水反复冲洗，直到没有醇味为止。对泽泻80%乙醇提取物分别用20%，40%，60%，70%，80%乙醇进行洗脱，得到不同梯度的洗脱液。

    2.1.3样品及对照品的制备AB-8大孔树脂70%乙醇洗脱液，蒸干溶剂，烘干至恒重，精确称取泽泻洗脱物10 mg置于10 mL量瓶中，加甲醇至刻度线 ......