猫耳刺皂苷ilexpernoside C抑制低密度脂蛋白多聚体诱导泡沫细胞形成的活性及机制研究(2)
2.2LDL的纯化、修饰和聚集根据以前报道的方法,利用密度梯度超速离心法,从人血浆中分离得到LDL[9]。得到的LDL经过0.45 μm滤膜过滤后,在含有1 mmol·L-1 EDTA的PBS溶液中与0.4 μg Dil(1,1-dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindocarbocyanine perchlorate)37 ℃孵育24 h。Dil-LDL通过与之前相同的离心和透析方法进行纯化,使用前避光4 ℃保存。纯化的Dil-LDL通过涡旋1 min进行聚集,接着用超声破碎仪冰上破碎大的聚集体,0.45 μm滤膜过滤。由此产生的Dil标记的聚集体LDL(Dil-aggLDL)在30~75 nm能最大限度的被THP-1细胞吞噬和吸收。
2.3IC1干预THP-1细胞对aggLDL吞噬试验已分化贴壁的THP-1细胞与IC1和10 mg·L-1的Dil-aggLDL(或aggLDL)在37 ℃避光孵育细胞24 h ......
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2.3IC1干预THP-1细胞对aggLDL吞噬试验已分化贴壁的THP-1细胞与IC1和10 mg·L-1的Dil-aggLDL(或aggLDL)在37 ℃避光孵育细胞24 h ......
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