基于HTRF方法的PGE2释放抑制高通量筛选模型的建立及其在中药活性成分发现中的应用(1)

http://www.100md.com 2016年2月1日 中国中药杂志2016年第3期

     [摘要]前列腺素E2( prostaglandins E2， PGE2)是参与炎症、疼痛等多种生理病理机制过程的活性物质。该文在脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7 产生PGE2的模型上， 利用均相时间分辨荧光(homogeneous time-resolved fluorescence，HTRF)方法结合全自动化筛选操作系统，建立检测PGE2含量的高通量模型，选用公司中药物质基础库内的5 121个中药成分为检测样品，用于筛选PGE2抑制剂。该模型选择细胞铺板密度为每孔2 000个细胞； 阳性化合物的IC₅₀平均值为(7.3±0.1) μmol；检测板的Z′因子均大于0.5，平均值为0.7；5 121个样品中有228个样品在检测浓度对PEG2产生的抑制率大于50% ......