穿心莲甲羟戊酸5—焦磷酸脱羧酶基因的克隆与表达(3)
亚细胞定位分析结果表明，MVD蛋白的N端不含有质体定位的信号肽。序列比对结果表明(图4)，MVD蛋白中包含11个保守氨基酸；有8个保守氨基酸、1个非保守氨基酸参与到与ATP结合的过程中[3，8]；307位保守的天冬氨酸是决定催化活性高低的关键氨基酸[9]。
用最大似然法(maximum likelihood)构建系统发育树(图5)，结果表明，穿心莲与丹参Salvia miltiorrhiza的MVD蛋白聚为一类，并与假马齿苋Bacopa monnieri、芝麻Sesamum indicum的MVD蛋白亲缘关系较近。
2.4 基因表达分析 Real time PCR检测基因表达结果表明(图6)，在穿心莲叶片中，MVD基因的表达量在花蕾期较低，初花期增加；到了花果混合期和青果期表达量均下降。而茎中的表达量趋势与叶片中不同，花蕾期MVD基因表达量最高，以后的3个时期表达量均较低。总体说来，无论是在茎还是叶片中，MVD基因在各时期表达量的倍数差异不大，均小于0.1。
3 讨论
由于穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯等活性成分的药理作用重要而广泛，并且穿心莲中新的活性成分、各活性成分新的药理作用不断被发现 ......
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用最大似然法(maximum likelihood)构建系统发育树(图5)，结果表明，穿心莲与丹参Salvia miltiorrhiza的MVD蛋白聚为一类，并与假马齿苋Bacopa monnieri、芝麻Sesamum indicum的MVD蛋白亲缘关系较近。
2.4 基因表达分析 Real time PCR检测基因表达结果表明(图6)，在穿心莲叶片中，MVD基因的表达量在花蕾期较低，初花期增加；到了花果混合期和青果期表达量均下降。而茎中的表达量趋势与叶片中不同，花蕾期MVD基因表达量最高，以后的3个时期表达量均较低。总体说来，无论是在茎还是叶片中，MVD基因在各时期表达量的倍数差异不大，均小于0.1。
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由于穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯等活性成分的药理作用重要而广泛，并且穿心莲中新的活性成分、各活性成分新的药理作用不断被发现 ......
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