香附酸的化学结构(1)
[摘要]对香附Cyperusrotundus化学成分进行研究，采用多种色谱技术(硅胶、氧化铝、Sephadex LH20、MCI gel CHP20P、HPLC等) 分离纯化，根据波谱学数据(IR，MS，1D，2DNMR)进行结构鉴定。从香附中分离得到13个化合物，其中包括3个倍半萜，3个三萜，4个酰胺，1个木脂素及2个其他类化合物。它们的结构被分别鉴定为香附酸(1)，(4S，5E，10R)7oxotrinoreudesm5en4βol(2)，4，7二甲基4羟基1四氢萘酮(3)，蒲公英萜酮(4)，达玛二烯醇乙酸酯(5)，泽屋萜(6)，假蒟亭碱(7)，几内亚胡椒酰胺(8)，墙草碱(9)，己内酰胺(10)，鹅掌楸苦素(11)，3hydroxy1(4hydroxy3，5dimethoxyphenyl)2[4(3hydroxy1(E)propenyl)2，6dimethoxyphenoxy]propylβDglucopyranoside(12)和1(3，4methylenedioxyphenyl)1Etetradecene(13)。其中，化合物1为一个新的链状倍半萜类化合物，其化学结构为6甲基2异丙烯基7，10二氧代十一酸，命名为香附酸；化合物2和3为2个降倍半萜类化合物。化合物2～13均为首次从该属植物中分离得到，该研究丰富了香附的化学成分种类。
[关键词]香附；香附酸；倍半萜；酰胺
香附Cyperi Rhizoma为莎草科植物莎草Cyperus rotundus L 的干燥根茎，始载于南北朝时期陶弘景的《名医别录》，为1963—2010年版的《中国药典》所收载。中药香附性平，味辛、微苦、甘，具有疏肝解郁，调经止痛之功效[1]。国外学者在20世纪二三十年代即对香附的化学成分进行了研究[24]，迄今，共从中分离鉴定了100多个化合物，主要包括萜类(单萜、倍半萜、三萜)，黄酮，生物碱等[5]。现代药理研究表明其具有抗菌、镇痛、抗肿瘤、抑制乙酰胆碱酯酶、抗糖尿病及雌激素样作用等活性[56]。本课题组利用HepG 2215细胞模型对香附进行了体外抗HBV活性研究，发现香附的90%和50%乙醇提取部位具有较强的抑制HBV DNA复制活性，为了阐明其活性物质，我们前期从其活性部位分离得到37个倍半萜类成分，特别是9个桉烷型倍半萜对HBV DNA的复制具有较好的抑制作用[7]。
为丰富香附的化学成分，本研究进一步对香附的乙酸乙酯萃取部位进行系统的化学成分研究，从中分离鉴定了13个化合物，其中化合物1为一个新的链状倍半萜，其余已知化合物(2～13)均为首次从莎草属中分离得到。
1材料
高分辨质谱用ITTOFLCMS(Shimadzu，Kyoto，Japan) 质谱仪测定，熔点通过SGWX4B显微熔点仪(上海精密科学仪器有限公司)测定。核磁共振谱用Brucker AM400，DRX500或Brucker Avance III600型超导核磁共振仪(Bruker，Bremerhaven，Germany)测定，TMS(四甲基硅烷) 作内标；红外光谱用BioRad FTS135型红外光谱仪测定(BioRad，Hercules，California，USA)；旋光通过Jascomodel 1020旋光仪(Horiba，Tokyo，Japan) 测定；高效液相为Waters Aillance 2695(Waters，USA)，色谱柱为YMCPack ODSA(20 mm×250 mm，10 μm)，中压液相(Dr FlashII) 为上海利穗产品。薄层色谱硅胶和柱色谱硅胶(200～300目) 分别购自青岛海洋化工有限公司和青岛美高集团有限公司；MCI CHP20P gel柱色谱分离材料购自日本三菱化学公司；Sephadex LH20来自Pharmacia 公司。分析纯甲醇购自江苏汉邦科技有限公司；显色剂为H2SO4(10%) 的乙醇溶液；所用其他试剂均为化学纯或分析纯。
香附于2011年4月购自云南省昆明市菊花村药材市场，经中国科学院昆明植物研究所雷立公副研究员鉴定为香附Cyperi Rhizoma，标本存放于中国科学院昆明植物研究所抗病毒与天然药物化学研究组(No 2011041101)。
2提取与分离
香附(5 kg)，粉碎后分别用90%和50%乙醇室温下浸泡2次，每次浸泡72 h。合并各浸泡液，减压浓缩至干；残留物混悬于2 L水中，用等量乙酸乙酯萃取4次，回收乙酸乙酯萃取液得乙酸乙酯部分(305 g)。乙酸乙酯部分经硅胶柱色谱(2 000 g，175 mm×35 cm)，用丙酮石油醚(0∶100～100∶0)梯度洗脱，经TLC检查并合并相同流分后得到9个组分(Frs E1～E9)。
Fr E3(22 g) 经硅胶柱色谱(400 g，8 cm×30 cm)，乙酸乙酯石油醚(5∶95) 洗脱，得到2个组分(Fr E31和Fr E32)。Fr E31(34 g) 经氧化铝柱色谱(60 g，2 cm×50 cm)，丙酮石油醚(3∶97)洗脱，得到2个组分(Fr E311和Fr E312)。Fr E311(23 g) 经氧化铝柱色谱(40 g，15 cm×40 cm)，用甲醇氯仿(1∶99) 洗脱，得到化合物4(77 mg)，5(45 mg)和13(10 mg)。Fr E312(800 mg) 经Sephadex LH20柱色谱(50 g，14 cm× 150 cm)，用甲醇氯仿(50∶50) 洗脱得到化合物6(10 mg)和8(5 mg)。Fr E32(176 g) 经氧化铝柱色谱分离(300 g，4 cm×28 cm)，丙酮石油醚(5∶95)洗脱，得到2个流分(Fr E321和Fr E322)。E322(11 g) 经硅胶柱色谱(150 g，25 cm× 50 cm)，用乙酸乙酯石油醚(20∶80～100∶0) 洗脱后，再经Sephadex LH20(50 g，14×150 cm) 纯化得到化合物2(40 mg)，3(18 mg)，7(15 mg)和9(3 mg)。 (许洪波 耿长安 张雪梅 马云保 黄晓燕 陈纪军)
[关键词]香附；香附酸；倍半萜；酰胺
香附Cyperi Rhizoma为莎草科植物莎草Cyperus rotundus L 的干燥根茎，始载于南北朝时期陶弘景的《名医别录》，为1963—2010年版的《中国药典》所收载。中药香附性平，味辛、微苦、甘，具有疏肝解郁，调经止痛之功效[1]。国外学者在20世纪二三十年代即对香附的化学成分进行了研究[24]，迄今，共从中分离鉴定了100多个化合物，主要包括萜类(单萜、倍半萜、三萜)，黄酮，生物碱等[5]。现代药理研究表明其具有抗菌、镇痛、抗肿瘤、抑制乙酰胆碱酯酶、抗糖尿病及雌激素样作用等活性[56]。本课题组利用HepG 2215细胞模型对香附进行了体外抗HBV活性研究，发现香附的90%和50%乙醇提取部位具有较强的抑制HBV DNA复制活性，为了阐明其活性物质，我们前期从其活性部位分离得到37个倍半萜类成分，特别是9个桉烷型倍半萜对HBV DNA的复制具有较好的抑制作用[7]。
为丰富香附的化学成分，本研究进一步对香附的乙酸乙酯萃取部位进行系统的化学成分研究，从中分离鉴定了13个化合物，其中化合物1为一个新的链状倍半萜，其余已知化合物(2～13)均为首次从莎草属中分离得到。
1材料
高分辨质谱用ITTOFLCMS(Shimadzu，Kyoto，Japan) 质谱仪测定，熔点通过SGWX4B显微熔点仪(上海精密科学仪器有限公司)测定。核磁共振谱用Brucker AM400，DRX500或Brucker Avance III600型超导核磁共振仪(Bruker，Bremerhaven，Germany)测定，TMS(四甲基硅烷) 作内标；红外光谱用BioRad FTS135型红外光谱仪测定(BioRad，Hercules，California，USA)；旋光通过Jascomodel 1020旋光仪(Horiba，Tokyo，Japan) 测定；高效液相为Waters Aillance 2695(Waters，USA)，色谱柱为YMCPack ODSA(20 mm×250 mm，10 μm)，中压液相(Dr FlashII) 为上海利穗产品。薄层色谱硅胶和柱色谱硅胶(200～300目) 分别购自青岛海洋化工有限公司和青岛美高集团有限公司；MCI CHP20P gel柱色谱分离材料购自日本三菱化学公司；Sephadex LH20来自Pharmacia 公司。分析纯甲醇购自江苏汉邦科技有限公司；显色剂为H2SO4(10%) 的乙醇溶液；所用其他试剂均为化学纯或分析纯。
香附于2011年4月购自云南省昆明市菊花村药材市场，经中国科学院昆明植物研究所雷立公副研究员鉴定为香附Cyperi Rhizoma，标本存放于中国科学院昆明植物研究所抗病毒与天然药物化学研究组(No 2011041101)。
2提取与分离
香附(5 kg)，粉碎后分别用90%和50%乙醇室温下浸泡2次，每次浸泡72 h。合并各浸泡液，减压浓缩至干；残留物混悬于2 L水中，用等量乙酸乙酯萃取4次，回收乙酸乙酯萃取液得乙酸乙酯部分(305 g)。乙酸乙酯部分经硅胶柱色谱(2 000 g，175 mm×35 cm)，用丙酮石油醚(0∶100～100∶0)梯度洗脱，经TLC检查并合并相同流分后得到9个组分(Frs E1～E9)。
Fr E3(22 g) 经硅胶柱色谱(400 g，8 cm×30 cm)，乙酸乙酯石油醚(5∶95) 洗脱，得到2个组分(Fr E31和Fr E32)。Fr E31(34 g) 经氧化铝柱色谱(60 g，2 cm×50 cm)，丙酮石油醚(3∶97)洗脱，得到2个组分(Fr E311和Fr E312)。Fr E311(23 g) 经氧化铝柱色谱(40 g，15 cm×40 cm)，用甲醇氯仿(1∶99) 洗脱，得到化合物4(77 mg)，5(45 mg)和13(10 mg)。Fr E312(800 mg) 经Sephadex LH20柱色谱(50 g，14 cm× 150 cm)，用甲醇氯仿(50∶50) 洗脱得到化合物6(10 mg)和8(5 mg)。Fr E32(176 g) 经氧化铝柱色谱分离(300 g，4 cm×28 cm)，丙酮石油醚(5∶95)洗脱，得到2个流分(Fr E321和Fr E322)。E322(11 g) 经硅胶柱色谱(150 g，25 cm× 50 cm)，用乙酸乙酯石油醚(20∶80～100∶0) 洗脱后，再经Sephadex LH20(50 g，14×150 cm) 纯化得到化合物2(40 mg)，3(18 mg)，7(15 mg)和9(3 mg)。 (许洪波 耿长安 张雪梅 马云保 黄晓燕 陈纪军)