姜辣素拮抗掌叶半夏毒针晶刺激性毒性的机制研究(2)
222巨噬细胞的提取分离纯化将健康大鼠脱颈椎处死，加入75%乙醇浸泡3 min后取出，腹腔注射20 mL PBS缓冲液，轻揉腹部5 min，使PBS缓冲液散布于整个腹腔，收集腹腔液，1 000 r·min-1离心5 min，得到富含巨噬细胞的沉淀。弃去上清，沉淀用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液重悬并调节细胞密度至1×106个/mL，将此密度的细胞接种于细胞板中，37 ℃，5% CO2环境下培养2 h后，用PBS缓冲液洗去未贴壁的细胞，未被洗去的贴壁细胞即为所需的巨噬细胞，非特异性酯酶染色鉴定巨噬细胞纯度为99%；台盼蓝染色鉴定细胞存活率为99%[9]。
223人外周血中性粒细胞的分离纯化无菌采集健康志愿者的外周静脉血，加EDTAK2抗凝，取5 mL，加等量生理盐水稀释，再加1/3体积的6% T500，混合后静置30 min，吸取上清于1 500 r·min-1离心10 min， 弃去上清液，沉淀用1 mL RPMI 1640培养液重悬。100%的Percoll细胞分离液用无菌生理盐水分别配成75%，60% 2种不同密度的分离液 ......
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223人外周血中性粒细胞的分离纯化无菌采集健康志愿者的外周静脉血，加EDTAK2抗凝，取5 mL，加等量生理盐水稀释，再加1/3体积的6% T500，混合后静置30 min，吸取上清于1 500 r·min-1离心10 min， 弃去上清液，沉淀用1 mL RPMI 1640培养液重悬。100%的Percoll细胞分离液用无菌生理盐水分别配成75%，60% 2种不同密度的分离液 ......
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