肠S9温孵法研究川芎多成分肠吸收过程中的肠壁代谢(2)
2方法
21溶液配制
211川芎水提液制备取川芎饮片10051 g,加1 L去离子水回流提取15 h,趁热过滤,滤渣加1 L去离子水再次提取,趁热过滤。合并滤液并浓缩,定容到100 mL量瓶中,备用,试验时稀释到所需浓度。
212对照品溶液配制分别精密称取阿魏酸、洋川芎内酯I对照品于10 mL量瓶中,甲醇溶解稀释为质量浓度约为02 g·L-1的对照品溶液。
213KCl溶液配制准确称取154 mmol·L-1KCl,加去离子水100 mL溶解制成115%的KCl溶液,放置备用。
21420 mmol·L-1HEPES缓冲液配制取20 mmol·L-1 HEPES,154 mmol·L-1KCl置100 mL量瓶中,加蒸馏水至刻度线附近,再用1 mol·L-1NaOH调节pH至741,即得。
22肠S9制备
大鼠禁食过夜(自由饮水),水合氯醛麻醉后,打开腹腔,用冰冷(0~4 ℃)的115%KCl冲洗至无内容物流出,取小肠,剪成小段,放入冰冷的115%KCl溶液中。剪开小肠,将小肠置于冰冷的玻璃板上,用玻璃片刮取小肠黏膜,加入冰冷的3倍量含有115%KCl的HEPES缓冲液(pH 74) ......
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21溶液配制
211川芎水提液制备取川芎饮片10051 g,加1 L去离子水回流提取15 h,趁热过滤,滤渣加1 L去离子水再次提取,趁热过滤。合并滤液并浓缩,定容到100 mL量瓶中,备用,试验时稀释到所需浓度。
212对照品溶液配制分别精密称取阿魏酸、洋川芎内酯I对照品于10 mL量瓶中,甲醇溶解稀释为质量浓度约为02 g·L-1的对照品溶液。
213KCl溶液配制准确称取154 mmol·L-1KCl,加去离子水100 mL溶解制成115%的KCl溶液,放置备用。
21420 mmol·L-1HEPES缓冲液配制取20 mmol·L-1 HEPES,154 mmol·L-1KCl置100 mL量瓶中,加蒸馏水至刻度线附近,再用1 mol·L-1NaOH调节pH至741,即得。
22肠S9制备
大鼠禁食过夜(自由饮水),水合氯醛麻醉后,打开腹腔,用冰冷(0~4 ℃)的115%KCl冲洗至无内容物流出,取小肠,剪成小段,放入冰冷的115%KCl溶液中。剪开小肠,将小肠置于冰冷的玻璃板上,用玻璃片刮取小肠黏膜,加入冰冷的3倍量含有115%KCl的HEPES缓冲液(pH 74) ......
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