何首乌肝毒性物质基础探索研究(1)

http://www.100md.com 2016年4月1日 《中国中药杂志》2016年第7期

     [摘要]通过观察何首乌中蒽醌类成分对HepG2细胞的细胞毒作用，并通过精密肝切片技术对细胞毒成分进行验证，探讨何首乌致肝毒性的物质基础。运用MTT法检测何首乌中游离蒽醌、结合蒽醌及柰类共11个单体成分对HepG2细胞的毒性。将有明确细胞毒的成分与大鼠肝切片共同培养6 h后制备肝组织匀浆，通过BCA 法测定匀浆液中蛋白含量，连续监测法测定并计算每1 μg蛋白中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ谷氨酰氨基转肽酶(GGT)和乳酸脱氢酶(LDH)的漏出率，以考察这些成分对肝组织的毒性作用。细胞试验结果显示，只有大黄酸、大黄素、大黄素甲醚8OβD葡萄糖苷和大黄素甲醚8O(6′O乙酰基)βD葡萄糖苷显示一定的细胞毒作用，其IC50分别为7107，12562，24227，40232 μmol·L-1，而其他7个化合物的毒性很小。肝切片试验结果显示，大黄酸400 μmol·L-1组能引起肝切片ALT，AST，LDH漏出率的显著升高(P<001)，100 μmol·L-1组能引起肝切片 LDH漏出率的显著升高(P<005)；随药物浓度增大，肝切片中蛋白含量显著下降(P<005)，显示有一定的量毒关系。大黄素400 μmol·L-1组可引起肝切片ALT ......