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编号:12965689
铁皮石斛内生真菌对宿主组培苗生长与代谢成分的影响(2)
http://www.100md.com 2016年5月1日 《中国中药杂志》2016年第9期
     22农艺性状考察

    将培养到一定阶段的组培苗取出,洗去培养基,用纸巾擦拭干净进行农艺性状考察。用直尺测量每株幼苗的苗高与根长,用游标卡尺测量茎基部粗、茎中部粗、叶长(叶片中脉长)与叶宽,计算叶长宽比=叶长/叶宽,统计每株苗根数、叶片数与萌条数,用电子天平称量接种组培苗茎鲜重与叶总鲜重,将茎与叶放置60 ℃烘箱烘干至恒重,分别称量茎与叶干重。每个处理测200株苗,每株苗取顶端3片叶进行考察,叶面积参考刘志高等[18]的方法估算。

    23组培苗代谢成分分析

    将烘至恒重的茎与叶样品粉碎,过60目筛,待用。茎总多糖含量测定采用苯酚硫酸法[19],标准曲线方程为Y=0012X-002,R2=0999 5,X为浓度,Y为吸光度,3次重复;参考俞巧仙等[20]的方法测定茎醇溶性浸出物,3次重复;茎醇溶性高效液相色谱条件:采用XB C18色谱柱(46 mm×250 mm,05 μm),25 ℃柱温,流动相为纯水(C)乙腈(D),采用梯度洗脱,检测波长为280 nm,进样量为10 μL;单糖衍生参照苑鹤等[21]的方法 ......
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