基于细胞色素C氧化酶基因(COI)和核糖体16SrDNA条形码的中药海蛇品种鉴定(2)
13仪器MB102型金属浴(美国BIOER公司)；MycyclerTM Thernalcycler PCR 仪(BIORAD，美国)；DL31DN水平电泳仪(东林昌盛生物有限公司)；DYY7C型电源(北京六一仪器厂)；Centrifuge 5415D型离心机(德国eppendorf公司)；2200 PRO型成像仪(美国柯达公司)；OSE470型TGREEN切胶器(北京天根生物技术有限公司)。
14DNA提取剪取干燥海蛇肌肉样品30 mg，放入15 mL EP管中，使用海洋生物基因组DNA提取试剂盒提取样品总DNA。具体步骤如下，向装有样品的EP管中加入GA缓冲液200 μL，再加入Proteinase K 20 μL，混匀，56 ℃放置2 h，取上清液加入200 μL的GB溶液，混匀，70 ℃放置10 min；加入200 μL无水乙醇并混匀：将液体转移到吸附柱中，离心弃废液；加入GD缓冲液500 μL，离心弃废液；加入PW 缓冲液，离心弃废液，并重复操作1次 ......
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14DNA提取剪取干燥海蛇肌肉样品30 mg，放入15 mL EP管中，使用海洋生物基因组DNA提取试剂盒提取样品总DNA。具体步骤如下，向装有样品的EP管中加入GA缓冲液200 μL，再加入Proteinase K 20 μL，混匀，56 ℃放置2 h，取上清液加入200 μL的GB溶液，混匀，70 ℃放置10 min；加入200 μL无水乙醇并混匀：将液体转移到吸附柱中，离心弃废液；加入GD缓冲液500 μL，离心弃废液；加入PW 缓冲液，离心弃废液，并重复操作1次 ......
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